辽宁畜牧兽医
遼寧畜牧獸醫
료녕축목수의
LIAONING JOURNAL OF ANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY MEDICINE
2003年
1期
3-5
,共3页
鸡致病性大肠杆菌%Ⅰ型菌毛%重组菌株%表达
鷄緻病性大腸桿菌%Ⅰ型菌毛%重組菌株%錶達
계치병성대장간균%Ⅰ형균모%중조균주%표체
用限制性内切酶SacI和BamHI双酶切克隆有鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的piliA基因的质粒pTFimO1、pTFimO2和pTFimO78,分别回收从此3质粒上切下的545bp的piliA基因片段,再将载体pET-28a(+)用SacI和BamHI双酶切,最后将pET-28a(+)DNA片段与545bp的piliA DNA片段进行连接,转化至受体菌BL21(DE3)中,经SacI和BamHI酶切反应鉴定重组子,得到了理想重组子质粒pETFimO1、pETFimO2和pETFimO78.重组菌株BL21(DE3) (pETFimO1)、BL21(DE3)(pETFimO2)和BL21(DE3)(pETFimO78)经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PAGE检测,结果表明重组菌株可以良好地表达鸡致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛蛋白.
用限製性內切酶SacI和BamHI雙酶切剋隆有鷄緻病性大腸桿菌分離株O1、O2和O78的piliA基因的質粒pTFimO1、pTFimO2和pTFimO78,分彆迴收從此3質粒上切下的545bp的piliA基因片段,再將載體pET-28a(+)用SacI和BamHI雙酶切,最後將pET-28a(+)DNA片段與545bp的piliA DNA片段進行連接,轉化至受體菌BL21(DE3)中,經SacI和BamHI酶切反應鑒定重組子,得到瞭理想重組子質粒pETFimO1、pETFimO2和pETFimO78.重組菌株BL21(DE3) (pETFimO1)、BL21(DE3)(pETFimO2)和BL21(DE3)(pETFimO78)經IPTG誘導後,其錶達產物經SDS-PAGE檢測,結果錶明重組菌株可以良好地錶達鷄緻病性大腸桿菌Ⅰ型菌毛蛋白.
용한제성내절매SacI화BamHI쌍매절극륭유계치병성대장간균분리주O1、O2화O78적piliA기인적질립pTFimO1、pTFimO2화pTFimO78,분별회수종차3질립상절하적545bp적piliA기인편단,재장재체pET-28a(+)용SacI화BamHI쌍매절,최후장pET-28a(+)DNA편단여545bp적piliA DNA편단진행련접,전화지수체균BL21(DE3)중,경SacI화BamHI매절반응감정중조자,득도료이상중조자질립pETFimO1、pETFimO2화pETFimO78.중조균주BL21(DE3) (pETFimO1)、BL21(DE3)(pETFimO2)화BL21(DE3)(pETFimO78)경IPTG유도후,기표체산물경SDS-PAGE검측,결과표명중조균주가이량호지표체계치병성대장간균Ⅰ형균모단백.
