现代消化及介入诊疗
現代消化及介入診療
현대소화급개입진료
MODERN DIGESTION & INTERVENTION
2006年
3期
133-135,191
,共4页
叶方鹏%李荣洲%肖冰%张万岱
葉方鵬%李榮洲%肖冰%張萬岱
협방붕%리영주%초빙%장만대
大肠癌%抑制消减杂交%cDNA文库
大腸癌%抑製消減雜交%cDNA文庫
대장암%억제소감잡교%cDNA문고
目的 利用抑制消减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)构建人大肠癌差异表达cDNA文库,分离并克隆出大肠癌发病的相关新基因.方法 运用抑制消减杂交技术分离大肠癌组织及癌旁正常黏膜差异表达基因的cDNA片断,将其与T载体连接构建文库,从库中随机挑取200个白色菌落,使用PCR方法鉴定阳性克隆并对其中50个克隆进行测序,将测序结果登录GenBank进行同源性对比分析,并对部分有意义的差异表达片断进行Virtual Northern Blot分析.结果 成功构建人源性大肠癌消减cDNA文库,通过筛选获得20个差异表达的基因,其中有2个片断未检测到同源性序列,根据杂交结果考虑可能是在大肠肿瘤中差异表达的新基因.结论 运用SSH技术成功构建了人大肠癌的差异表达的cDNA消减杂交文库,并筛选出 2个在大肠肿瘤中差异表达的新基因.
目的 利用抑製消減雜交技術(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)構建人大腸癌差異錶達cDNA文庫,分離併剋隆齣大腸癌髮病的相關新基因.方法 運用抑製消減雜交技術分離大腸癌組織及癌徬正常黏膜差異錶達基因的cDNA片斷,將其與T載體連接構建文庫,從庫中隨機挑取200箇白色菌落,使用PCR方法鑒定暘性剋隆併對其中50箇剋隆進行測序,將測序結果登錄GenBank進行同源性對比分析,併對部分有意義的差異錶達片斷進行Virtual Northern Blot分析.結果 成功構建人源性大腸癌消減cDNA文庫,通過篩選穫得20箇差異錶達的基因,其中有2箇片斷未檢測到同源性序列,根據雜交結果攷慮可能是在大腸腫瘤中差異錶達的新基因.結論 運用SSH技術成功構建瞭人大腸癌的差異錶達的cDNA消減雜交文庫,併篩選齣 2箇在大腸腫瘤中差異錶達的新基因.
목적 이용억제소감잡교기술(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)구건인대장암차이표체cDNA문고,분리병극륭출대장암발병적상관신기인.방법 운용억제소감잡교기술분리대장암조직급암방정상점막차이표체기인적cDNA편단,장기여T재체련접구건문고,종고중수궤도취200개백색균락,사용PCR방법감정양성극륭병대기중50개극륭진행측서,장측서결과등록GenBank진행동원성대비분석,병대부분유의의적차이표체편단진행Virtual Northern Blot분석.결과 성공구건인원성대장암소감cDNA문고,통과사선획득20개차이표체적기인,기중유2개편단미검측도동원성서렬,근거잡교결과고필가능시재대장종류중차이표체적신기인.결론 운용SSH기술성공구건료인대장암적차이표체적cDNA소감잡교문고,병사선출 2개재대장종류중차이표체적신기인.
