华西药学杂志
華西藥學雜誌
화서약학잡지
WEST CHINA JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES
2006年
3期
215-218
,共4页
祁志荣%李明远%张林%蒋忠华%代吕霞%李虹
祁誌榮%李明遠%張林%蔣忠華%代呂霞%李虹
기지영%리명원%장림%장충화%대려하%리홍
干扰素诱导蛋白10(IP-10)%NIH 3T3细胞%真核表达%自身免疫性疾病%免疫荧光
榦擾素誘導蛋白10(IP-10)%NIH 3T3細胞%真覈錶達%自身免疫性疾病%免疫熒光
간우소유도단백10(IP-10)%NIH 3T3세포%진핵표체%자신면역성질병%면역형광
目的构建大鼠干扰素诱导蛋白-10(IP-10)基因的真核表达质粒,并研究其在NIH 3T3细胞中的表达情况.方法通过PCR获得实验所需的IP-10基因片段,通过酶切IP-10基因片段、真核表达质粒载体pEGFP-c1和连接反应,构建IP-10的真核表达质粒pEGFP-c1-IP-10,重组质粒经限制性内切酶、PCR及DNA序列测定证实构建成功后,用PolyFect脂质体转染NIH 3T3细胞,然后用免疫荧光技术检测pEGFP-c1-IP-10在NIH 3T3细胞中的表达.结果酶切分析、PCR及DNA序列测定证实,IP-10基因片段被成功克隆入真核表达质粒载体pEGFP-c1,免疫荧光技术检测证实,该基因能在NIH 3T3细胞中表达.结论证实IP-10基因可在NIH 3T3细胞中表达,为将其作为DNA疫苗治疗自身免疫性疾病的研究奠定了基础.
目的構建大鼠榦擾素誘導蛋白-10(IP-10)基因的真覈錶達質粒,併研究其在NIH 3T3細胞中的錶達情況.方法通過PCR穫得實驗所需的IP-10基因片段,通過酶切IP-10基因片段、真覈錶達質粒載體pEGFP-c1和連接反應,構建IP-10的真覈錶達質粒pEGFP-c1-IP-10,重組質粒經限製性內切酶、PCR及DNA序列測定證實構建成功後,用PolyFect脂質體轉染NIH 3T3細胞,然後用免疫熒光技術檢測pEGFP-c1-IP-10在NIH 3T3細胞中的錶達.結果酶切分析、PCR及DNA序列測定證實,IP-10基因片段被成功剋隆入真覈錶達質粒載體pEGFP-c1,免疫熒光技術檢測證實,該基因能在NIH 3T3細胞中錶達.結論證實IP-10基因可在NIH 3T3細胞中錶達,為將其作為DNA疫苗治療自身免疫性疾病的研究奠定瞭基礎.
목적구건대서간우소유도단백-10(IP-10)기인적진핵표체질립,병연구기재NIH 3T3세포중적표체정황.방법통과PCR획득실험소수적IP-10기인편단,통과매절IP-10기인편단、진핵표체질립재체pEGFP-c1화련접반응,구건IP-10적진핵표체질립pEGFP-c1-IP-10,중조질립경한제성내절매、PCR급DNA서렬측정증실구건성공후,용PolyFect지질체전염NIH 3T3세포,연후용면역형광기술검측pEGFP-c1-IP-10재NIH 3T3세포중적표체.결과매절분석、PCR급DNA서렬측정증실,IP-10기인편단피성공극륭입진핵표체질립재체pEGFP-c1,면역형광기술검측증실,해기인능재NIH 3T3세포중표체.결론증실IP-10기인가재NIH 3T3세포중표체,위장기작위DNA역묘치료자신면역성질병적연구전정료기출.
