新的锌指蛋白Mip1的DNA结合序列的筛选
신적자지단백Mip1적DNA결합서렬적사선
Screening of DNA blinding site of a novel zinc finger protein Mip1
  • 万方数据
    中国现代医学杂志 중국현대의학잡지
    CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
    2008年 8期 1048-1051 ,共4页

    蒋磊%王慷慨%陈广文%刘可%邓恭华%涂自智%刘梅冬%王桂良%肖献忠

    장뢰%왕강개%진엄문%류가%산공화%도자지%류매동%왕계량%초헌충

    新基因%Mip1%锌指蛋白%表达与纯化%寡核苷酸文库%DNA结合位点 新基因%Mip1%鋅指蛋白%錶達與純化%寡覈苷痠文庫%DNA結閤位點
    신기인%Mip1%자지단백%표체여순화%과핵감산문고%DNA결합위점
    目的 筛选一个新的锌指蛋白Mip1的DNA结合位点.方法 将Mip1 cDNA全长克隆入原核表达质粒pGEX-4T-1构建了Mip1的原核表达质粒pGEX-Mip1.用谷胱甘肽亲和层析纯化GST-Mip1融合蛋白.通过固定化的GST-Mip1,从寡核苷酸文库中俘获Mip1的结合的寡核苷酸片段;将所得寡核苷酸片段插入T-载体,通过测序、序列比对得到DNA结合位点.结果 锌指蛋白Mip1的融合蛋白能在大肠杆菌中高效表达,能与固定化还原性谷胱甘肽很好地亲和而得到纯化;用固定化的Mip1融合蛋白俘获到了其结合的寡核苷酸序列,通过测序、序列比对,得到了Mip1的DNA结合位点.结论 Mip1的DNA结合位点的核心序列为G/TCCTA,Mip1的DNA结合位点的成功确定为Mip1功能的深入研究打下了基础.
    목적 사선일개신적자지단백Mip1적DNA결합위점.방법 장Mip1 cDNA전장극륭입원핵표체질립pGEX-4T-1구건료Mip1적원핵표체질립pGEX-Mip1.용곡광감태친화층석순화GST-Mip1융합단백.통과고정화적GST-Mip1,종과핵감산문고중부획Mip1적결합적과핵감산편단;장소득과핵감산편단삽입T-재체,통과측서、서렬비대득도DNA결합위점.결과 자지단백Mip1적융합단백능재대장간균중고효표체,능여고정화환원성곡광감태흔호지친화이득도순화;용고정화적Mip1융합단백부획도료기결합적과핵감산서렬,통과측서、서렬비대,득도료Mip1적DNA결합위점.결론 Mip1적DNA결합위점적핵심서렬위G/TCCTA,Mip1적DNA결합위점적성공학정위Mip1공능적심입연구타하료기출.
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