现代食品科技
現代食品科技
현대식품과기
MODERN FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2010年
8期
789-792,783
,共5页
徐爱群%曹以诚%区镜深%张珍武
徐愛群%曹以誠%區鏡深%張珍武
서애군%조이성%구경심%장진무
肝癌%mcl-1%基因沉默%实时荧光定量PCR
肝癌%mcl-1%基因沉默%實時熒光定量PCR
간암%mcl-1%기인침묵%실시형광정량PCR
本文构建了靶向mcl-l基因构建的特异性siRNA重组质粒,在细胞水平检测的其抑制效果,并筛选出能高效抑制mcl-l基因表达的siRNA重组质粒,针对mcl-1的特异性siRNA重组质粒,将其转染到人肝癌细胞HepG2,用Rt-PCR(实时荧光定量PCR)方法和Western Blot方法分别检测转染前后mcl-1mRNA水平和Mcl-1蛋白表达水平,比较对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1的抑制效果.结果表明,Rt-PCR结果显示对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1均可降低mcl-1 mRNA水平,最大抑制效率达70.0%,远高于作为对照非相关组;Western-Blot结果显示转染特异性siRNA重组质粒后Mcl-1蛋白表达受到抑制,最大抑制率为44.2%.合理设计的特异性siRNA重组质粒可大幅度下调mcl-1 mRNA水平,能有效抑制Mcl-1蛋白表达.
本文構建瞭靶嚮mcl-l基因構建的特異性siRNA重組質粒,在細胞水平檢測的其抑製效果,併篩選齣能高效抑製mcl-l基因錶達的siRNA重組質粒,針對mcl-1的特異性siRNA重組質粒,將其轉染到人肝癌細胞HepG2,用Rt-PCR(實時熒光定量PCR)方法和Western Blot方法分彆檢測轉染前後mcl-1mRNA水平和Mcl-1蛋白錶達水平,比較對應不同位點的兩箇siRNA重組質粒對mcl-1的抑製效果.結果錶明,Rt-PCR結果顯示對應不同位點的兩箇siRNA重組質粒對mcl-1均可降低mcl-1 mRNA水平,最大抑製效率達70.0%,遠高于作為對照非相關組;Western-Blot結果顯示轉染特異性siRNA重組質粒後Mcl-1蛋白錶達受到抑製,最大抑製率為44.2%.閤理設計的特異性siRNA重組質粒可大幅度下調mcl-1 mRNA水平,能有效抑製Mcl-1蛋白錶達.
본문구건료파향mcl-l기인구건적특이성siRNA중조질립,재세포수평검측적기억제효과,병사선출능고효억제mcl-l기인표체적siRNA중조질립,침대mcl-1적특이성siRNA중조질립,장기전염도인간암세포HepG2,용Rt-PCR(실시형광정량PCR)방법화Western Blot방법분별검측전염전후mcl-1mRNA수평화Mcl-1단백표체수평,비교대응불동위점적량개siRNA중조질립대mcl-1적억제효과.결과표명,Rt-PCR결과현시대응불동위점적량개siRNA중조질립대mcl-1균가강저mcl-1 mRNA수평,최대억제효솔체70.0%,원고우작위대조비상관조;Western-Blot결과현시전염특이성siRNA중조질립후Mcl-1단백표체수도억제,최대억제솔위44.2%.합리설계적특이성siRNA중조질립가대폭도하조mcl-1 mRNA수평,능유효억제Mcl-1단백표체.
