中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2010年
4期
47-53
,共7页
夏兴霞%王永山%孟祥升%朱国强%张雪寒%何孔旺
夏興霞%王永山%孟祥升%硃國彊%張雪寒%何孔旺
하흥하%왕영산%맹상승%주국강%장설한%하공왕
大肠杆菌O157∶H7%单克隆抗体%胶体金%免疫层析试纸条%人兽共患病
大腸桿菌O157∶H7%單剋隆抗體%膠體金%免疫層析試紙條%人獸共患病
대장간균O157∶H7%단극륭항체%효체금%면역층석시지조%인수공환병
用E.coli O157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株.其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106.用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜(NC)上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条.用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106 CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1～5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查.
用E.coli O157∶H7菌體免疫BALB/c鼠,製備免疫脾細胞,與SP2/0骨髓瘤細胞融閤,穫得瞭16株分泌單剋隆抗體(mAb)的雜交瘤細胞株.其中,1D3、2E7和2H7三株為O157∶H7特異單剋隆抗體,Ig亞類分彆為IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗體ELISA效價分彆為103、105和106.用純化的單剋隆抗體2E7標記膠體金,製備金標抗體玻璃纖維素膜;將純化的2H7和羊抗鼠IgG分彆作為檢測和對照捕捉抗體包被于硝痠纖維素膜(NC)上;組裝成雙抗夾心法O157∶H7膠體金免疫層析檢測試紙條.用該試紙條可特異檢測O157∶H7,敏感度為106 CFU/mL,與相同單剋隆抗體2H7和2E7建立的O157∶H7夾心ELISA檢測方法的敏感度相噹,試紙條簡便快速,在1～5 min內可得齣檢測結果,便于O157∶H7的臨床快速診斷與現場檢測樣品的快速篩查.
용E.coli O157∶H7균체면역BALB/c서,제비면역비세포,여SP2/0골수류세포융합,획득료16주분비단극륭항체(mAb)적잡교류세포주.기중,1D3、2E7화2H7삼주위O157∶H7특이단극륭항체,Ig아류분별위IgMκ、IgG2bκ화IgG2bκ,복수항체ELISA효개분별위103、105화106.용순화적단극륭항체2E7표기효체금,제비금표항체파리섬유소막;장순화적2H7화양항서IgG분별작위검측화대조포착항체포피우초산섬유소막(NC)상;조장성쌍항협심법O157∶H7효체금면역층석검측시지조.용해시지조가특이검측O157∶H7,민감도위106 CFU/mL,여상동단극륭항체2H7화2E7건립적O157∶H7협심ELISA검측방법적민감도상당,시지조간편쾌속,재1～5 min내가득출검측결과,편우O157∶H7적림상쾌속진단여현장검측양품적쾌속사사.
