动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2010年
12期
58-61
,共4页
于丽%邵烈刚%刘海军%胡仁建%余华%叶芬%蔡家利
于麗%邵烈剛%劉海軍%鬍仁建%餘華%葉芬%蔡傢利
우려%소렬강%류해군%호인건%여화%협분%채가리
猪繁殖与呼吸综合征病毒%N蛋白%表达质粒pREST-N%纯化
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%N蛋白%錶達質粒pREST-N%純化
저번식여호흡종합정병독%N단백%표체질립pREST-N%순화
利用含有PRRSV N蛋白基因的重组表达质粒pREST-N的大肠埃希菌,在37℃条件下,用终浓度为1 mmol/L的IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,目的基因高效表达出分子质量约为17.8 ku的可溶性融合蛋白,分子质量与预期设计的N蛋白大小相符.经His-Ni2+柱亲和层析纯化后,得到了高纯度的N蛋白.通过Western blot分析,该重组N蛋白与兔抗PRRSV高免血清能够发生特异性反应,说明其具有良好的反应原性,为进一步研究PRRSV的抗体检测方法及诊断抗原的批量生产工艺奠定了基础.
利用含有PRRSV N蛋白基因的重組錶達質粒pREST-N的大腸埃希菌,在37℃條件下,用終濃度為1 mmol/L的IPTG進行誘導錶達,經SDS-PAGE分析,目的基因高效錶達齣分子質量約為17.8 ku的可溶性融閤蛋白,分子質量與預期設計的N蛋白大小相符.經His-Ni2+柱親和層析純化後,得到瞭高純度的N蛋白.通過Western blot分析,該重組N蛋白與兔抗PRRSV高免血清能夠髮生特異性反應,說明其具有良好的反應原性,為進一步研究PRRSV的抗體檢測方法及診斷抗原的批量生產工藝奠定瞭基礎.
이용함유PRRSV N단백기인적중조표체질립pREST-N적대장애희균,재37℃조건하,용종농도위1 mmol/L적IPTG진행유도표체,경SDS-PAGE분석,목적기인고효표체출분자질량약위17.8 ku적가용성융합단백,분자질량여예기설계적N단백대소상부.경His-Ni2+주친화층석순화후,득도료고순도적N단백.통과Western blot분석,해중조N단백여토항PRRSV고면혈청능구발생특이성반응,설명기구유량호적반응원성,위진일보연구PRRSV적항체검측방법급진단항원적비량생산공예전정료기출.
