CAJ | 학술논문

目的研究白细胞介素-12(IL-12)对日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14FABP)DNA疫苗的免疫增强效果.方法分别构建pVIVO2-Sj14FABP和pVIVO2-IL-2-Si14FABP疫苗,鉴定构建成功后免疫小鼠.48只雄性BALB/c小鼠随机分为A、B、C和D等4组,分别用0.9%NaCl(对照组)、pVIVO2、pVIVO2-Sj14FABP和pVIVO2-IL-12-Sj14FABP肌注免疫1次(100μg/只).免疫后30 d各组小鼠感染40±2条尾蚴,感染后45 d剖杀,计数成虫及肝内虫卵;同时用ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体水平,用双夹心ELISA法检测脾淋巴细胞经伴刀豆球蛋白A(ConA)和可溶性虫卵抗原(SEA)刺激后培养上清中自细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)含量.结果经PCR和酶切鉴定,成功构建pVIVO2-Sj14FABP和pVIVO2-IL-2-Sj14FABP重组质粒;C、D组免疫后分别获得24.1%和39.4%的减虫率、27.2%和32.8%的减卵率;细胞因子检测结果,D组经ConA和SEA诱生的IL-2和IFN-γ水平显著增高(P＜0.01),而IL-4水平显著降低,差异有统计学意义(p＜0.01);免疫后30 d小鼠血清IgG水平无明显升高,各实验组间差异也无统计学意义(P＞0.05).结论Sj14FABP DNA疫苗可诱导BALB/c小鼠产生部分抗血吸虫感染保护作用,细胞因子IL-12能够诱导机体免疫反应向Th1型优势分化,并增强血吸虫病DNA疫苗免疫保护性效果.
목적연구백세포개소-12(IL-12)대일본혈흡충지방산결합단백(Sj14FABP)DNA역묘적면역증강효과.방법분별구건pVIVO2-Sj14FABP화pVIVO2-IL-2-Si14FABP역묘,감정구건성공후면역소서.48지웅성BALB/c소서수궤분위A、B、C화D등4조,분별용0.9%NaCl(대조조)、pVIVO2、pVIVO2-Sj14FABP화pVIVO2-IL-12-Sj14FABP기주면역1차(100μg/지).면역후30 d각조소서감염40±2조미유,감염후45 d부살,계수성충급간내충란;동시용ELISA법검측소서혈청중IgG항체수평,용쌍협심ELISA법검측비림파세포경반도두구단백A(ConA)화가용성충란항원(SEA)자격후배양상청중자세포개소-2(IL-2)、백세포개소-4(IL-4)화간우소-γ(IFN-γ)함량.결과경PCR화매절감정,성공구건pVIVO2-Sj14FABP화pVIVO2-IL-2-Sj14FABP중조질립;C、D조면역후분별획득24.1%화39.4%적감충솔、27.2%화32.8%적감란솔;세포인자검측결과,D조경ConA화SEA유생적IL-2화IFN-γ수평현저증고(P＜0.01),이IL-4수평현저강저,차이유통계학의의(p＜0.01);면역후30 d소서혈청IgG수평무명현승고,각실험조간차이야무통계학의의(P＞0.05).결론Sj14FABP DNA역묘가유도BALB/c소서산생부분항혈흡충감염보호작용,세포인자IL-12능구유도궤체면역반응향Th1형우세분화,병증강혈흡충병DNA역묘면역보호성효과.