CAJ | 학술논문

本研究设计了CP1和CP10两种嵌合肽免疫原,它们由人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β-hCG)3个线性B细胞表位(BCE)以及包括来自乙肝表面抗原和破伤风类毒素2个广谱性T细胞表位(TCE)的6个TCEs组合而成.编码CP1及其衍生物CP10的人工基因分别重组插入热诱导pBV221载体后,均能在大肠杆菌中以约占细菌总蛋白1%的比例被表达.在蛋白印迹试验中,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶上显示约为16.5 kD分子量的CP1和CP10表达蛋白,能被抗各插入表位单克隆或多克隆抗体识别.各表达蛋白可用制备性PAGE方法一步纯化,纯化产物均显示95%以上的电泳均一性,纯化得率可达到每升培养液1-2mg水平.以它们为抗原主动免疫小鼠,都能分别产生识别CP1或CP10和天然β-hCG的抗血清,并都能在它们的抗血清中检测到各插入抗原表位的抗体.hCG CPs的可获得性及其能诱导各表位抗体生成特征,有可能成为研制hCG抗生育和肿瘤治疗性疫苗的新的候选免疫原.
본연구설계료CP1화CP10량충감합태면역원,타문유인융모막촉성선격소β아단위(β-hCG)3개선성B세포표위(BCE)이급포괄래자을간표면항원화파상풍류독소2개엄보성T세포표위(TCE)적6개TCEs조합이성.편마CP1급기연생물CP10적인공기인분별중조삽입열유도pBV221재체후,균능재대장간균중이약점세균총단백1%적비례피표체.재단백인적시험중,재SDS-취병희선알응효전영응효상현시약위16.5 kD분자량적CP1화CP10표체단백,능피항각삽입표위단극륭혹다극륭항체식별.각표체단백가용제비성PAGE방법일보순화,순화산물균현시95%이상적전영균일성,순화득솔가체도매승배양액1-2mg수평.이타문위항원주동면역소서,도능분별산생식별CP1혹CP10화천연β-hCG적항혈청,병도능재타문적항혈청중검측도각삽입항원표위적항체.hCG CPs적가획득성급기능유도각표위항체생성특정,유가능성위연제hCG항생육화종류치료성역묘적신적후선면역원.