中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2006年
6期
571-573
,共3页
刘兰军%何太平%杨春%雍雪飞%何敏%葛永红
劉蘭軍%何太平%楊春%雍雪飛%何敏%葛永紅
류란군%하태평%양춘%옹설비%하민%갈영홍
人巨细胞病毒%包膜糖蛋白%抗原决定簇
人巨細胞病毒%包膜糖蛋白%抗原決定簇
인거세포병독%포막당단백%항원결정족
目的 克隆人巨细胞病毒包膜糖蛋白gB/AD-1片段并构建其原核表达系统.方法 用PCR法从人巨细胞病毒AD169株基因组DNA中扩增gB/AD-1片段并克隆至pGEM-T载体,酶切后,亚克隆至表达载体pET-15b,构建重组表达质粒pET-15b/gB/AD-1,并转化大肠杆菌,IPTG诱导表达.表达产物经金属螯合层析一步纯化,并用Western blot鉴定.结果 gB/AD-1蛋白表达量达到35%.表达产物经纯化后,纯度大于95%.经Western blot检测,表达产物与CMV阳性人血清发生特异性反应.结论 已成功构建重组表达载体pET-15b/gB/AD-1,并在大肠杆菌中高水平表达gB/AD-1.
目的 剋隆人巨細胞病毒包膜糖蛋白gB/AD-1片段併構建其原覈錶達繫統.方法 用PCR法從人巨細胞病毒AD169株基因組DNA中擴增gB/AD-1片段併剋隆至pGEM-T載體,酶切後,亞剋隆至錶達載體pET-15b,構建重組錶達質粒pET-15b/gB/AD-1,併轉化大腸桿菌,IPTG誘導錶達.錶達產物經金屬螯閤層析一步純化,併用Western blot鑒定.結果 gB/AD-1蛋白錶達量達到35%.錶達產物經純化後,純度大于95%.經Western blot檢測,錶達產物與CMV暘性人血清髮生特異性反應.結論 已成功構建重組錶達載體pET-15b/gB/AD-1,併在大腸桿菌中高水平錶達gB/AD-1.
목적 극륭인거세포병독포막당단백gB/AD-1편단병구건기원핵표체계통.방법 용PCR법종인거세포병독AD169주기인조DNA중확증gB/AD-1편단병극륭지pGEM-T재체,매절후,아극륭지표체재체pET-15b,구건중조표체질립pET-15b/gB/AD-1,병전화대장간균,IPTG유도표체.표체산물경금속오합층석일보순화,병용Western blot감정.결과 gB/AD-1단백표체량체도35%.표체산물경순화후,순도대우95%.경Western blot검측,표체산물여CMV양성인혈청발생특이성반응.결론 이성공구건중조표체재체pET-15b/gB/AD-1,병재대장간균중고수평표체gB/AD-1.
