浙江大学学报（工学版）
浙江大學學報（工學版）
절강대학학보（공학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(ENGINEERING SCIENCE)
2006年
11期
2011-2015
,共5页
卢敏%龚兴国%郭建军%盛卸晃%汪辰卉%郑乐
盧敏%龔興國%郭建軍%盛卸晃%汪辰卉%鄭樂
로민%공흥국%곽건군%성사황%왕신훼%정악
念珠藻%超氧化物歧化酶(SOD)%高效表达%抗肿瘤活性
唸珠藻%超氧化物歧化酶(SOD)%高效錶達%抗腫瘤活性
념주조%초양화물기화매(SOD)%고효표체%항종류활성
根据低等物种Fe-SOD核酸序列设计简并引物,以念珠藻基因组为模板,扩增获得了念珠藻Fe-SOD基因.将此基因重组至原核表达载体pET22b(+),构建成工程菌pET-SOD,并转化至大肠杆菌宿主.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得Fe-SOD蛋白分子量约为28 kD,占全菌蛋白的78%,并以包涵体形式表达.经Ni2+亲和层析柱纯化后,目的蛋白的SOD比活力达1 100 U/mg,在紫外可见光谱中表现出金属Fe的特征峰.肿瘤细胞共培养试验表明,此Fe-SOD具有一定的抗SPC-A-1肺腺癌细胞增殖的能力.
根據低等物種Fe-SOD覈痠序列設計簡併引物,以唸珠藻基因組為模闆,擴增穫得瞭唸珠藻Fe-SOD基因.將此基因重組至原覈錶達載體pET22b(+),構建成工程菌pET-SOD,併轉化至大腸桿菌宿主.異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達穫得Fe-SOD蛋白分子量約為28 kD,佔全菌蛋白的78%,併以包涵體形式錶達.經Ni2+親和層析柱純化後,目的蛋白的SOD比活力達1 100 U/mg,在紫外可見光譜中錶現齣金屬Fe的特徵峰.腫瘤細胞共培養試驗錶明,此Fe-SOD具有一定的抗SPC-A-1肺腺癌細胞增殖的能力.
근거저등물충Fe-SOD핵산서렬설계간병인물,이념주조기인조위모판,확증획득료념주조Fe-SOD기인.장차기인중조지원핵표체재체pET22b(+),구건성공정균pET-SOD,병전화지대장간균숙주.이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도표체획득Fe-SOD단백분자량약위28 kD,점전균단백적78%,병이포함체형식표체.경Ni2+친화층석주순화후,목적단백적SOD비활력체1 100 U/mg,재자외가견광보중표현출금속Fe적특정봉.종류세포공배양시험표명,차Fe-SOD구유일정적항SPC-A-1폐선암세포증식적능력.
