华中科技大学学报(医学版)
華中科技大學學報(醫學版)
화중과기대학학보(의학판)
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2008年
1期
125-128
,共4页
刘黎琼%李明莹%刘伟%刘隽%李小青%黄士昂
劉黎瓊%李明瑩%劉偉%劉雋%李小青%黃士昂
류려경%리명형%류위%류준%리소청%황사앙
Mel 18基因%U937细胞%急性白血病%细胞增殖
Mel 18基因%U937細胞%急性白血病%細胞增殖
Mel 18기인%U937세포%급성백혈병%세포증식
目的 研究Mel 18基因在急性白血病细胞株U937的表达情况及其对U937细胞生长的影响.方法 RT_PCR方法检测Mel 18在U937细胞中的表达.用亚克隆技术构建真核表达质粒pLenti6/V5-Mel 18,脂质体转染法将重组质粒pLenti6/V5一Mel 18和对照质粒pLenti6/V5一LacZ分别导入U937细胞,以RT-PCR法和流式细胞仪检测U937细胞转染后Mel 18的表达情况,CCK-8法检测细胞增殖活性.结果 U937细胞中未检测到Mel 18的表达.成功构建了Mel 18的正义真核表达质粒pLenti6/V5-Mel 18,并将其成功导入U937细胞.pLenti6/V5一Mel 18质粒转染U937细胞24 h后,流式检测Mel 18蛋白的阳性表达率为(23.75±2.32)%.相对于亲代细胞,转染pLenti6/V5-Mel 18组与转染pLenti6/V5一LacZ组的24 h增殖活性分别为(70.86±1.08)%和(95.89±1.26)%,48 h增殖活性为(46.93±1.12)%和(95.43±1.63)%,差异均有极显著性意义(P<0.01).结论 U937细胞不表达Mel 18基因,上调Mel 18的表达能明显抑制U937细胞的生长.
目的 研究Mel 18基因在急性白血病細胞株U937的錶達情況及其對U937細胞生長的影響.方法 RT_PCR方法檢測Mel 18在U937細胞中的錶達.用亞剋隆技術構建真覈錶達質粒pLenti6/V5-Mel 18,脂質體轉染法將重組質粒pLenti6/V5一Mel 18和對照質粒pLenti6/V5一LacZ分彆導入U937細胞,以RT-PCR法和流式細胞儀檢測U937細胞轉染後Mel 18的錶達情況,CCK-8法檢測細胞增殖活性.結果 U937細胞中未檢測到Mel 18的錶達.成功構建瞭Mel 18的正義真覈錶達質粒pLenti6/V5-Mel 18,併將其成功導入U937細胞.pLenti6/V5一Mel 18質粒轉染U937細胞24 h後,流式檢測Mel 18蛋白的暘性錶達率為(23.75±2.32)%.相對于親代細胞,轉染pLenti6/V5-Mel 18組與轉染pLenti6/V5一LacZ組的24 h增殖活性分彆為(70.86±1.08)%和(95.89±1.26)%,48 h增殖活性為(46.93±1.12)%和(95.43±1.63)%,差異均有極顯著性意義(P<0.01).結論 U937細胞不錶達Mel 18基因,上調Mel 18的錶達能明顯抑製U937細胞的生長.
목적 연구Mel 18기인재급성백혈병세포주U937적표체정황급기대U937세포생장적영향.방법 RT_PCR방법검측Mel 18재U937세포중적표체.용아극륭기술구건진핵표체질립pLenti6/V5-Mel 18,지질체전염법장중조질립pLenti6/V5일Mel 18화대조질립pLenti6/V5일LacZ분별도입U937세포,이RT-PCR법화류식세포의검측U937세포전염후Mel 18적표체정황,CCK-8법검측세포증식활성.결과 U937세포중미검측도Mel 18적표체.성공구건료Mel 18적정의진핵표체질립pLenti6/V5-Mel 18,병장기성공도입U937세포.pLenti6/V5일Mel 18질립전염U937세포24 h후,류식검측Mel 18단백적양성표체솔위(23.75±2.32)%.상대우친대세포,전염pLenti6/V5-Mel 18조여전염pLenti6/V5일LacZ조적24 h증식활성분별위(70.86±1.08)%화(95.89±1.26)%,48 h증식활성위(46.93±1.12)%화(95.43±1.63)%,차이균유겁현저성의의(P<0.01).결론 U937세포불표체Mel 18기인,상조Mel 18적표체능명현억제U937세포적생장.