上海交通大学学报(医学版)
上海交通大學學報(醫學版)
상해교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2008年
2期
228-231
,共4页
周佳%沈尊理%金羽青%刘伟%沈华
週佳%瀋尊理%金羽青%劉偉%瀋華
주가%침존리%금우청%류위%침화
骨髓基质干细胞%纯化%流式筛选%复合胶原酶
骨髓基質榦細胞%純化%流式篩選%複閤膠原酶
골수기질간세포%순화%류식사선%복합효원매
目的 研究在体外快速获得骨髓基质干细胞及纯化的方法.方法 采用流式细胞仪筛选法获得CD45-、CD90+原代细胞,复合胶原酶差速消化逐级传代、纯化;对第3代(P3代)细胞进行脂肪细胞、软骨细胞、骨细胞三向诱导;2～4周后,分别行oil red'O、Safranin'O和茜素红染色,倒置显微镜下观察诱导结果.结果 经流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化,传代至P3代,细胞形态已呈现均一性.向脂肪细胞诱导后第4周,oil red'O染色见细胞内大量红染的脂滴;向软骨细胞诱导后第4周,Safranin'O染色见多数切片呈阳性,细胞团块中存在大量软骨特异性的陷窝样结构;向骨细胞诱导后第4周,茜素红染色发现肉眼可见广泛散在的红色阳性钙结节.结论 本研究所采用的流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化法,可快速获得高纯度的骨髓基质干细胞.
目的 研究在體外快速穫得骨髓基質榦細胞及純化的方法.方法 採用流式細胞儀篩選法穫得CD45-、CD90+原代細胞,複閤膠原酶差速消化逐級傳代、純化;對第3代(P3代)細胞進行脂肪細胞、軟骨細胞、骨細胞三嚮誘導;2～4週後,分彆行oil red'O、Safranin'O和茜素紅染色,倒置顯微鏡下觀察誘導結果.結果 經流式細胞儀初篩和複閤膠原酶差速消化,傳代至P3代,細胞形態已呈現均一性.嚮脂肪細胞誘導後第4週,oil red'O染色見細胞內大量紅染的脂滴;嚮軟骨細胞誘導後第4週,Safranin'O染色見多數切片呈暘性,細胞糰塊中存在大量軟骨特異性的陷窩樣結構;嚮骨細胞誘導後第4週,茜素紅染色髮現肉眼可見廣汎散在的紅色暘性鈣結節.結論 本研究所採用的流式細胞儀初篩和複閤膠原酶差速消化法,可快速穫得高純度的骨髓基質榦細胞.
목적 연구재체외쾌속획득골수기질간세포급순화적방법.방법 채용류식세포의사선법획득CD45-、CD90+원대세포,복합효원매차속소화축급전대、순화;대제3대(P3대)세포진행지방세포、연골세포、골세포삼향유도;2～4주후,분별행oil red'O、Safranin'O화천소홍염색,도치현미경하관찰유도결과.결과 경류식세포의초사화복합효원매차속소화,전대지P3대,세포형태이정현균일성.향지방세포유도후제4주,oil red'O염색견세포내대량홍염적지적;향연골세포유도후제4주,Safranin'O염색견다수절편정양성,세포단괴중존재대량연골특이성적함와양결구;향골세포유도후제4주,천소홍염색발현육안가견엄범산재적홍색양성개결절.결론 본연구소채용적류식세포의초사화복합효원매차속소화법,가쾌속획득고순도적골수기질간세포.
