广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
6期
746-749
,共4页
吕玉明%程立明%裴国献%俞庆声%蔡哲%郭丽丽%舒峻%张可华
呂玉明%程立明%裴國獻%俞慶聲%蔡哲%郭麗麗%舒峻%張可華
려옥명%정립명%배국헌%유경성%채철%곽려려%서준%장가화
骨髓基质干细胞%血管内皮样细胞%血管内皮细胞生长因子%成纤维细胞生长因子
骨髓基質榦細胞%血管內皮樣細胞%血管內皮細胞生長因子%成纖維細胞生長因子
골수기질간세포%혈관내피양세포%혈관내피세포생장인자%성섬유세포생장인자
目的 采用血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导犬骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs),探讨BMSCs向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的潜能和内皮细胞的特征性鉴定方法.方法 采集犬髂骨骨髓15~20 mL,全骨髓10%FBS DMEM培养液进行原代培养.将第2代纯化的BMSCs细胞悬液接种于含VEGF、bFGF的DMEM/F12培养液(细胞接种密度为1×106·mL-1)体外诱导培养.对细胞形态特征进行观察,对诱导分化的细胞行CD31、vWF、VEGFR-2荧光免疫蛋白检测.结果 原代培养的BMSCs形态呈长梭形或不规则形,呈均匀分布生长.诱导分化后的细胞光镜下单层融合生长,呈铺路石样形态;电镜下细胞呈多边形,可见特征性的Weibel-Palade小体;经成血管内皮细胞诱导培养7～14 d后,BMSCs诱导分化细胞CD31、vWF和VEGFR-2的表达呈阳性.结论 犬BMSCs易于体外分离培养及扩增,经VEGF、bFGF体外定向诱导后的细胞具有血管内皮细胞的特征且细胞纯度高、数量大.
目的 採用血管內皮細胞生長因子(VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)定嚮誘導犬骨髓基質榦細胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs),探討BMSCs嚮內皮細胞(endothelial cells,ECs)分化的潛能和內皮細胞的特徵性鑒定方法.方法 採集犬髂骨骨髓15~20 mL,全骨髓10%FBS DMEM培養液進行原代培養.將第2代純化的BMSCs細胞懸液接種于含VEGF、bFGF的DMEM/F12培養液(細胞接種密度為1×106·mL-1)體外誘導培養.對細胞形態特徵進行觀察,對誘導分化的細胞行CD31、vWF、VEGFR-2熒光免疫蛋白檢測.結果 原代培養的BMSCs形態呈長梭形或不規則形,呈均勻分佈生長.誘導分化後的細胞光鏡下單層融閤生長,呈鋪路石樣形態;電鏡下細胞呈多邊形,可見特徵性的Weibel-Palade小體;經成血管內皮細胞誘導培養7～14 d後,BMSCs誘導分化細胞CD31、vWF和VEGFR-2的錶達呈暘性.結論 犬BMSCs易于體外分離培養及擴增,經VEGF、bFGF體外定嚮誘導後的細胞具有血管內皮細胞的特徵且細胞純度高、數量大.
목적 채용혈관내피세포생장인자(VEGF)、감성성섬유세포생장인자(bFGF)정향유도견골수기질간세포(bone marrow stromal stem cells,BMSCs),탐토BMSCs향내피세포(endothelial cells,ECs)분화적잠능화내피세포적특정성감정방법.방법 채집견가골골수15~20 mL,전골수10%FBS DMEM배양액진행원대배양.장제2대순화적BMSCs세포현액접충우함VEGF、bFGF적DMEM/F12배양액(세포접충밀도위1×106·mL-1)체외유도배양.대세포형태특정진행관찰,대유도분화적세포행CD31、vWF、VEGFR-2형광면역단백검측.결과 원대배양적BMSCs형태정장사형혹불규칙형,정균균분포생장.유도분화후적세포광경하단층융합생장,정포로석양형태;전경하세포정다변형,가견특정성적Weibel-Palade소체;경성혈관내피세포유도배양7～14 d후,BMSCs유도분화세포CD31、vWF화VEGFR-2적표체정양성.결론 견BMSCs역우체외분리배양급확증,경VEGF、bFGF체외정향유도후적세포구유혈관내피세포적특정차세포순도고、수량대.
