生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2012年
4期
37-41
,共5页
苏国栋%刘畅%张少平%王光进
囌國棟%劉暢%張少平%王光進
소국동%류창%장소평%왕광진
表面展示%α凝集素%南极假丝酵母脂肪酶B%酶活力
錶麵展示%α凝集素%南極假絲酵母脂肪酶B%酶活力
표면전시%α응집소%남겁가사효모지방매B%매활력
目的:将南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)通过α凝集素3’末端功能区域展示在毕赤酵母表面.方法:采用PCR方法扩增得到CALB成熟肽编码基因,将其连接到α凝集素3’末端的上游再与穿梭载体pPIC9K连接,构建表面展示载体p KNSCALB.检测其水解活力和相关酶学性质.结果:展示CALB的毕赤酵母在甲醇的诱导下,表现出水解活性,最高可达382 U/g干细胞.对展示CALB的酶学性质研究表明:其最适温度为45℃,最适pH为8.0,60℃水浴4h后残留酶活力高于最大酶活力的50％,其水解对硝基苯酚丁酸酯的酶活力最高.结论:利用α凝集素成功将CALB展示于毕赤酵母表面,酶活力有较大提高.
目的:將南極假絲酵母脂肪酶B(CALB)通過α凝集素3’末耑功能區域展示在畢赤酵母錶麵.方法:採用PCR方法擴增得到CALB成熟肽編碼基因,將其連接到α凝集素3’末耑的上遊再與穿梭載體pPIC9K連接,構建錶麵展示載體p KNSCALB.檢測其水解活力和相關酶學性質.結果:展示CALB的畢赤酵母在甲醇的誘導下,錶現齣水解活性,最高可達382 U/g榦細胞.對展示CALB的酶學性質研究錶明:其最適溫度為45℃,最適pH為8.0,60℃水浴4h後殘留酶活力高于最大酶活力的50％,其水解對硝基苯酚丁痠酯的酶活力最高.結論:利用α凝集素成功將CALB展示于畢赤酵母錶麵,酶活力有較大提高.
목적:장남겁가사효모지방매B(CALB)통과α응집소3’말단공능구역전시재필적효모표면.방법:채용PCR방법확증득도CALB성숙태편마기인,장기련접도α응집소3’말단적상유재여천사재체pPIC9K련접,구건표면전시재체p KNSCALB.검측기수해활력화상관매학성질.결과:전시CALB적필적효모재갑순적유도하,표현출수해활성,최고가체382 U/g간세포.대전시CALB적매학성질연구표명:기최괄온도위45℃,최괄pH위8.0,60℃수욕4h후잔류매활력고우최대매활력적50％,기수해대초기분분정산지적매활력최고.결론:이용α응집소성공장CALB전시우필적효모표면,매활력유교대제고.
