CAJ | 학술논문

目的寻找白癜风患者血清中抗体识别的人黑素浓集素受体-1(MCHR1)B细胞表位肽段.方法从重组质粒pcDNA3/MCHR1中PCR扩增包含预测抗原表位MCHR1肽段的基因,构建重组表达载体pGEX-4T/MCHR1,经限制性内切酶双酶切及DNA测序鉴定,转化大肠杆菌DH5α,利用谷胱甘肽巯基转移酶(GST)纯化试剂盒纯化表达的融合蛋白.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定所表达的蛋白是否具有白癜风患者血清识别的表位.结果选择表达最可能包含B细胞表位的MCHR1氨基酸1～94(aa1～94),构建表达载体pGEX4T/MCHR1,得到纯化的重组蛋白GST-MCHR1相对分子质量为37 000.ELISA法检测结果显示,13.2%的白癜风患者血清抗MCHR1自身抗体IgG呈阳性反应.结论MCHR1aa1～94包含了白癜风患者自身抗体IgG识别的B细胞表位,为研究白癜风的发病机制奠定基础.
목적심조백전풍환자혈청중항체식별적인흑소농집소수체-1(MCHR1)B세포표위태단.방법종중조질립pcDNA3/MCHR1중PCR확증포함예측항원표위MCHR1태단적기인,구건중조표체재체pGEX-4T/MCHR1,경한제성내절매쌍매절급DNA측서감정,전화대장간균DH5α,이용곡광감태구기전이매(GST)순화시제합순화표체적융합단백.채용매련면역흡부시험(ELISA)감정소표체적단백시부구유백전풍환자혈청식별적표위.결과선택표체최가능포함B세포표위적MCHR1안기산1～94(aa1～94),구건표체재체pGEX4T/MCHR1,득도순화적중조단백GST-MCHR1상대분자질량위37 000.ELISA법검측결과현시,13.2%적백전풍환자혈청항MCHR1자신항체IgG정양성반응.결론MCHR1aa1～94포함료백전풍환자자신항체IgG식별적B세포표위,위연구백전풍적발병궤제전정기출.