CAJ | 학술논문

目的观察内毒素/脂多糖(LPS)及烧伤血清对豚鼠结肠带平滑肌细胞钙激活钾通道(KCa)的影响,探讨烧伤后发生胃肠动力障碍的分子电生理机制.方法用急性酶分离法获取单个健康豚鼠结肠带平滑肌细胞,在对称性高钾溶液中采用细胞膜片钳单通道记录技术,分别记录细胞贴附式膜片(电极位于细胞膜外面)和内面向外式膜片(电极位于细胞膜内面)上的电流.引出的电流信号经转换器转换,输入计算机,用离子通道计算机分析系统进行数据处理,并测定以下指标:(1)电流幅值(CA);(2)开放概率(PO);(3)开放时间(OT);(4)关闭时间(CT),以检测其特性并鉴定是否为KCa.确定为KCa后,向浴液中分别加入20、40、60、80、100 mg/L的LPS,观察LPS对两种膜片方式上KCa的影响.在浴液中分别加入正常血清和烧伤血清,观察血清对KCa的影响.结果在对称性高钾溶液中,豚鼠结肠带平滑肌细胞内面向外式膜片上的KCa电导值为(271±7)pS,是高电导的离子通道.随着膜去极化及细胞内Ca2+增加,通道PO增加,该通道可被细胞外低浓度的钾通道阻断剂四乙胺(TEA,1 mmol/L)所阻断,而膜内面较高浓度的TEA(40 mmol/L)对该通道无阻断作用,证实为KCa.当Ca2+为0 mol/L时,向浴液中分别加入20、40、60、80、100 mg/L的LPS,两种膜片方式KCa活性随LPS浓度的增加而增加.40 mg/L以上的LPS对KCa具有明显激活作用,通道PO显著增加(P＜0.05或0.01),用不含LPS的浴液灌流后亦不能回转.两种膜片方式下烧伤血清对KCa有激活作用,而正常血清无此作用.结论LPS和烧伤血清可通过激活肠道平滑肌细胞KCa抑制肠道蠕动.
목적관찰내독소/지다당(LPS)급소상혈청대돈서결장대평활기세포개격활갑통도(KCa)적영향,탐토소상후발생위장동력장애적분자전생리궤제.방법용급성매분리법획취단개건강돈서결장대평활기세포,재대칭성고갑용액중채용세포막편겸단통도기록기술,분별기록세포첩부식막편(전겁위우세포막외면)화내면향외식막편(전겁위우세포막내면)상적전류.인출적전류신호경전환기전환,수입계산궤,용리자통도계산궤분석계통진행수거처리,병측정이하지표:(1)전류폭치(CA);(2)개방개솔(PO);(3)개방시간(OT);(4)관폐시간(CT),이검측기특성병감정시부위KCa.학정위KCa후,향욕액중분별가입20、40、60、80、100 mg/L적LPS,관찰LPS대량충막편방식상KCa적영향.재욕액중분별가입정상혈청화소상혈청,관찰혈청대KCa적영향.결과재대칭성고갑용액중,돈서결장대평활기세포내면향외식막편상적KCa전도치위(271±7)pS,시고전도적리자통도.수착막거겁화급세포내Ca2+증가,통도PO증가,해통도가피세포외저농도적갑통도조단제사을알(TEA,1 mmol/L)소조단,이막내면교고농도적TEA(40 mmol/L)대해통도무조단작용,증실위KCa.당Ca2+위0 mol/L시,향욕액중분별가입20、40、60、80、100 mg/L적LPS,량충막편방식KCa활성수LPS농도적증가이증가.40 mg/L이상적LPS대KCa구유명현격활작용,통도PO현저증가(P＜0.05혹0.01),용불함LPS적욕액관류후역불능회전.량충막편방식하소상혈청대KCa유격활작용,이정상혈청무차작용.결론LPS화소상혈청가통과격활장도평활기세포KCa억제장도연동.