中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2007年
11期
1363-1365
,共3页
肠上皮细胞%缺血%缺氧%钙
腸上皮細胞%缺血%缺氧%鈣
장상피세포%결혈%결양%개
目的 建立子鼠肠上皮细胞(IEC)添加人工基底膜体外原代培养,模拟缺血缺氧损伤后胞内钙含量、膜脂流动性、IEC凋亡及采用钙通道阻断剂的影响.方法 建立子鼠IEC分离与原代培养和缺血缺氧模拟环境,设立对照组(A组),缺氧组(B组),缺血组(C组),缺血缺氧组(D组)及加维拉珀米2mg/L的相应对照组.利用流式细胞仪(FCM)计算凋亡细胞率,激光共聚焦显微镜检测胞内钙含量;自旋标记-顺磁共振技术(ESR)检测膜脂流动性.结果 B、C、D组IEC凋亡较A组明显增加(P＜0.05);加用钙离子阻断剂后B1、C1、D1组较相应对照组减少(P＜0.05).缺血缺氧损伤导致胞内钙超载,尤以D组最显著,其次为B组,C组;加用钙通道阻断剂后细胞内钙含量下降,以D1组最明显(P＜0.01),依次为B1组,C1组.损伤组膜蛋白构像改变、运动速度减慢,表现为强固定化与弱固定化组分谱线高度比值(hs/hw)明显增大及膜蛋白旋转相关时间(τc)显著延长,D组最为明显(P＜0.01),其次为B组,C组;加用钙通道阻断剂后hs/hw和τc有不同程度的恢复,与损伤组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 缺血缺氧损伤后,膜脂流动性发生变化及胞内钙超载和IEC凋亡一致;钙通道阻断剂可降低胞内钙含量,减轻膜蛋白的构像改变,减少细胞凋亡.
目的 建立子鼠腸上皮細胞(IEC)添加人工基底膜體外原代培養,模擬缺血缺氧損傷後胞內鈣含量、膜脂流動性、IEC凋亡及採用鈣通道阻斷劑的影響.方法 建立子鼠IEC分離與原代培養和缺血缺氧模擬環境,設立對照組(A組),缺氧組(B組),缺血組(C組),缺血缺氧組(D組)及加維拉珀米2mg/L的相應對照組.利用流式細胞儀(FCM)計算凋亡細胞率,激光共聚焦顯微鏡檢測胞內鈣含量;自鏇標記-順磁共振技術(ESR)檢測膜脂流動性.結果 B、C、D組IEC凋亡較A組明顯增加(P＜0.05);加用鈣離子阻斷劑後B1、C1、D1組較相應對照組減少(P＜0.05).缺血缺氧損傷導緻胞內鈣超載,尤以D組最顯著,其次為B組,C組;加用鈣通道阻斷劑後細胞內鈣含量下降,以D1組最明顯(P＜0.01),依次為B1組,C1組.損傷組膜蛋白構像改變、運動速度減慢,錶現為彊固定化與弱固定化組分譜線高度比值(hs/hw)明顯增大及膜蛋白鏇轉相關時間(τc)顯著延長,D組最為明顯(P＜0.01),其次為B組,C組;加用鈣通道阻斷劑後hs/hw和τc有不同程度的恢複,與損傷組比較,差異有統計學意義(P＜0.05).結論 缺血缺氧損傷後,膜脂流動性髮生變化及胞內鈣超載和IEC凋亡一緻;鈣通道阻斷劑可降低胞內鈣含量,減輕膜蛋白的構像改變,減少細胞凋亡.
목적 건립자서장상피세포(IEC)첨가인공기저막체외원대배양,모의결혈결양손상후포내개함량、막지류동성、IEC조망급채용개통도조단제적영향.방법 건립자서IEC분리여원대배양화결혈결양모의배경,설립대조조(A조),결양조(B조),결혈조(C조),결혈결양조(D조)급가유랍박미2mg/L적상응대조조.이용류식세포의(FCM)계산조망세포솔,격광공취초현미경검측포내개함량;자선표기-순자공진기술(ESR)검측막지류동성.결과 B、C、D조IEC조망교A조명현증가(P＜0.05);가용개리자조단제후B1、C1、D1조교상응대조조감소(P＜0.05).결혈결양손상도치포내개초재,우이D조최현저,기차위B조,C조;가용개통도조단제후세포내개함량하강,이D1조최명현(P＜0.01),의차위B1조,C1조.손상조막단백구상개변、운동속도감만,표현위강고정화여약고정화조분보선고도비치(hs/hw)명현증대급막단백선전상관시간(τc)현저연장,D조최위명현(P＜0.01),기차위B조,C조;가용개통도조단제후hs/hw화τc유불동정도적회복,여손상조비교,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 결혈결양손상후,막지류동성발생변화급포내개초재화IEC조망일치;개통도조단제가강저포내개함량,감경막단백적구상개변,감소세포조망.
