CAJ | 학술논문

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)反义核酸对膀胱癌细胞恶性表型的抑制作用.方法采用脂质体介导方法,分别构建转染COX-2反义真核表达载体和空载体的膀胱癌细胞系5637-AS细胞和5637-P细胞,RT-PCR及Western blot分析转染细胞COX-2 mRNA及蛋白表达水平.MTT比色实验、Boyden侵袭小室法和裸鼠成瘤实验分别检测转染细胞体外增殖速度、体外侵袭力和体内成瘤性.结果RT-PCR结果显示,5637-AS细胞COX-2/磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA比值(0.65)明显低于5637(0.92)和5637-P细胞(0.90);Western blot提示5637-AS细胞COX-2/β-actin比值(0.29)明显低于5637细胞(0.46)和5637-P细胞(0.44).MTT比色实验显示5637-AS细胞较5637-P、5637细胞生长速度减慢,三者倍增时间分别为3.6 d、2.9 d和2.9 d.体外侵袭实验结果表明,5637-AS侵袭细胞数显著低于5637细胞及5637-P细胞(18.20±5.97比45.40±8.12,18.20±5.97比44.10±6.47,P＜0.01).裸鼠成瘤实验中,5637-P、5637细胞接种裸鼠后第5天肿瘤长出,而5637-AS细胞第7天肿瘤长出;30 d后5637-AS细胞接种组瘤体重量(392.15 mg±33.58 mg)明显小于5637细胞(738.26 mg±66.32 mg),和5637-P细胞接种组(698.53 mg±88.76 mg),P＜0.01.结论膀胱癌细胞中COX-2过表达与细胞的恶性表型相关,反义技术抑制COX-2表达可以逆转膀胱癌细胞的恶性表型.
목적탐토배양합매-2(COX-2)반의핵산대방광암세포악성표형적억제작용.방법채용지질체개도방법,분별구건전염COX-2반의진핵표체재체화공재체적방광암세포계5637-AS세포화5637-P세포,RT-PCR급Western blot분석전염세포COX-2 mRNA급단백표체수평.MTT비색실험、Boyden침습소실법화라서성류실험분별검측전염세포체외증식속도、체외침습력화체내성류성.결과RT-PCR결과현시,5637-AS세포COX-2/린산감유철탈경매(GAPDH)mRNA비치(0.65)명현저우5637(0.92)화5637-P세포(0.90);Western blot제시5637-AS세포COX-2/β-actin비치(0.29)명현저우5637세포(0.46)화5637-P세포(0.44).MTT비색실험현시5637-AS세포교5637-P、5637세포생장속도감만,삼자배증시간분별위3.6 d、2.9 d화2.9 d.체외침습실험결과표명,5637-AS침습세포수현저저우5637세포급5637-P세포(18.20±5.97비45.40±8.12,18.20±5.97비44.10±6.47,P＜0.01).라서성류실험중,5637-P、5637세포접충라서후제5천종류장출,이5637-AS세포제7천종류장출;30 d후5637-AS세포접충조류체중량(392.15 mg±33.58 mg)명현소우5637세포(738.26 mg±66.32 mg),화5637-P세포접충조(698.53 mg±88.76 mg),P＜0.01.결론방광암세포중COX-2과표체여세포적악성표형상관,반의기술억제COX-2표체가이역전방광암세포적악성표형.