中华劳动卫生职业病杂志
中華勞動衛生職業病雜誌
중화노동위생직업병잡지
CHINESE JOURNAL OF INDUSTRIAL HYGIENE AND OCCUPATIONAL DISEASES
2005年
5期
329-332
,共4页
贾效伟%刘秉慈%史香林%高艾%尤宝荣%叶萌%沈福海%杜宏举
賈效偉%劉秉慈%史香林%高艾%尤寶榮%葉萌%瀋福海%杜宏舉
가효위%류병자%사향림%고애%우보영%협맹%침복해%두굉거
全反式视黄酸%苯并(a)芘%细胞周期素D1%转录因子%细胞周期
全反式視黃痠%苯併(a)芘%細胞週期素D1%轉錄因子%細胞週期
전반식시황산%분병(a)비%세포주기소D1%전록인자%세포주기
目的观察全反式视黄酸(ATRA)逆转苯并(a)芘诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)细胞周期紊乱过程中细胞周期素D1(cyclin D1)、细胞周期素依赖性激酶K4(CDK4)、转录因子E2F-1和E2F-4的作用.方法用0.1 μmol/L ATRA预处理细胞后,再用2 μmol/L苯并(a)芘作用细胞,用Western blotting方法测定其蛋白表达水平;建立稳定转染了反义cyclin D1质粒和反义CDK4质粒的细胞系,应用反义技术证明上下游关系;用流式细胞技术测定细胞周期.结果2 μnol/L苯并(a)芘作用于HELF24h后,cyclin D1、E2F-1蛋白表达水平明显增高,CDK4和E2F-4蛋白表达水平无明显变化;用0.1 μmol/LATRA预处理24h后,cyclin D1、E2F-1蛋白表达水平明显下降;与相同作用的对照组相比,苯并(a)芘刺激反义cyclin D1或反义CDK4细胞后E2F-1表达增加的幅度明显降低;与相同作用的对照组相比ATRA预处理的反义cyclin D1或反义CDK4细胞中,苯并(a)芘诱导的E2F-1过表达水平降低的幅度明显降低;流式细胞术测定结果显示,苯并(a)芘诱导细胞从G1期进入S期,ATRA通过聚积G1期细胞而阻滞苯并(a)芘诱导的细胞周期进程.结论ATRA通过cyclin D1/E2F-1途径阻断苯并(a)芘诱导的HELF的细胞周期改变.
目的觀察全反式視黃痠(ATRA)逆轉苯併(a)芘誘導的人胚肺成纖維細胞(HELF)細胞週期紊亂過程中細胞週期素D1(cyclin D1)、細胞週期素依賴性激酶K4(CDK4)、轉錄因子E2F-1和E2F-4的作用.方法用0.1 μmol/L ATRA預處理細胞後,再用2 μmol/L苯併(a)芘作用細胞,用Western blotting方法測定其蛋白錶達水平;建立穩定轉染瞭反義cyclin D1質粒和反義CDK4質粒的細胞繫,應用反義技術證明上下遊關繫;用流式細胞技術測定細胞週期.結果2 μnol/L苯併(a)芘作用于HELF24h後,cyclin D1、E2F-1蛋白錶達水平明顯增高,CDK4和E2F-4蛋白錶達水平無明顯變化;用0.1 μmol/LATRA預處理24h後,cyclin D1、E2F-1蛋白錶達水平明顯下降;與相同作用的對照組相比,苯併(a)芘刺激反義cyclin D1或反義CDK4細胞後E2F-1錶達增加的幅度明顯降低;與相同作用的對照組相比ATRA預處理的反義cyclin D1或反義CDK4細胞中,苯併(a)芘誘導的E2F-1過錶達水平降低的幅度明顯降低;流式細胞術測定結果顯示,苯併(a)芘誘導細胞從G1期進入S期,ATRA通過聚積G1期細胞而阻滯苯併(a)芘誘導的細胞週期進程.結論ATRA通過cyclin D1/E2F-1途徑阻斷苯併(a)芘誘導的HELF的細胞週期改變.
목적관찰전반식시황산(ATRA)역전분병(a)비유도적인배폐성섬유세포(HELF)세포주기문란과정중세포주기소D1(cyclin D1)、세포주기소의뢰성격매K4(CDK4)、전록인자E2F-1화E2F-4적작용.방법용0.1 μmol/L ATRA예처리세포후,재용2 μmol/L분병(a)비작용세포,용Western blotting방법측정기단백표체수평;건립은정전염료반의cyclin D1질립화반의CDK4질립적세포계,응용반의기술증명상하유관계;용류식세포기술측정세포주기.결과2 μnol/L분병(a)비작용우HELF24h후,cyclin D1、E2F-1단백표체수평명현증고,CDK4화E2F-4단백표체수평무명현변화;용0.1 μmol/LATRA예처리24h후,cyclin D1、E2F-1단백표체수평명현하강;여상동작용적대조조상비,분병(a)비자격반의cyclin D1혹반의CDK4세포후E2F-1표체증가적폭도명현강저;여상동작용적대조조상비ATRA예처리적반의cyclin D1혹반의CDK4세포중,분병(a)비유도적E2F-1과표체수평강저적폭도명현강저;류식세포술측정결과현시,분병(a)비유도세포종G1기진입S기,ATRA통과취적G1기세포이조체분병(a)비유도적세포주기진정.결론ATRA통과cyclin D1/E2F-1도경조단분병(a)비유도적HELF적세포주기개변.
