中华放射医学与防护杂志
中華放射醫學與防護雜誌
중화방사의학여방호잡지
Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection
2001年
5期
335-338
,共4页
杨光%裴雪涛%李梁%周雅德%冯凯%白慈贤
楊光%裴雪濤%李樑%週雅德%馮凱%白慈賢
양광%배설도%리량%주아덕%풍개%백자현
造血细胞%巨核系细胞%基质细胞%血小板生成素(TPO)
造血細胞%巨覈繫細胞%基質細胞%血小闆生成素(TPO)
조혈세포%거핵계세포%기질세포%혈소판생성소(TPO)
目的研究TPO基因修饰的基质细胞对CD34+造血细胞向巨核系细胞定向增殖分化的影响.方法将TPO cDNA构建到pBabe/pura中,通过"乒乓转染法"获得产高滴度逆转录病毒载体的包装细胞;利用所获的病毒上清转染基质细胞HFCL,用Northern blot检测细胞中TPO基因的表达,并利用TPO依赖株检测上清中的TPO活性;以未转基因的HFCL为对照,将CD34+造血细胞在TPO基因修饰的HFCL支持下扩增,用流式细胞仪检测扩增细胞中表型为CD34+CD41+和表型为CD41-CD61+细胞的比例.结果基质细胞HFCL能够有效表达外源性TPO基因,在HFCL/TPO培养上清中有0 75 ng/ml水平的TPO活性;并且在HFCL/TPO支持下,CD34+造血细胞经过7 d扩增后,CD34+CD41+细胞的比例为(13.7±2.0)%,HFCL为(6.5±1.8)%(P＜0.01);CD41+CD61+细胞的比例为(11.9±0.7)%,略高于HFCL的(10.6±1.5)%(P＞0.05).结论基质细胞能够有效表达外源性TPO基因和其蛋白,而且TPO基因修饰的基质细胞能显著促进CD34+CD41+巨核祖细胞的扩增,但对较成熟的CD41+CD61+巨核细胞影响不明显.
目的研究TPO基因脩飾的基質細胞對CD34+造血細胞嚮巨覈繫細胞定嚮增殖分化的影響.方法將TPO cDNA構建到pBabe/pura中,通過"乒乓轉染法"穫得產高滴度逆轉錄病毒載體的包裝細胞;利用所穫的病毒上清轉染基質細胞HFCL,用Northern blot檢測細胞中TPO基因的錶達,併利用TPO依賴株檢測上清中的TPO活性;以未轉基因的HFCL為對照,將CD34+造血細胞在TPO基因脩飾的HFCL支持下擴增,用流式細胞儀檢測擴增細胞中錶型為CD34+CD41+和錶型為CD41-CD61+細胞的比例.結果基質細胞HFCL能夠有效錶達外源性TPO基因,在HFCL/TPO培養上清中有0 75 ng/ml水平的TPO活性;併且在HFCL/TPO支持下,CD34+造血細胞經過7 d擴增後,CD34+CD41+細胞的比例為(13.7±2.0)%,HFCL為(6.5±1.8)%(P＜0.01);CD41+CD61+細胞的比例為(11.9±0.7)%,略高于HFCL的(10.6±1.5)%(P＞0.05).結論基質細胞能夠有效錶達外源性TPO基因和其蛋白,而且TPO基因脩飾的基質細胞能顯著促進CD34+CD41+巨覈祖細胞的擴增,但對較成熟的CD41+CD61+巨覈細胞影響不明顯.
목적연구TPO기인수식적기질세포대CD34+조혈세포향거핵계세포정향증식분화적영향.방법장TPO cDNA구건도pBabe/pura중,통과"핑퐁전염법"획득산고적도역전록병독재체적포장세포;이용소획적병독상청전염기질세포HFCL,용Northern blot검측세포중TPO기인적표체,병이용TPO의뢰주검측상청중적TPO활성;이미전기인적HFCL위대조,장CD34+조혈세포재TPO기인수식적HFCL지지하확증,용류식세포의검측확증세포중표형위CD34+CD41+화표형위CD41-CD61+세포적비례.결과기질세포HFCL능구유효표체외원성TPO기인,재HFCL/TPO배양상청중유0 75 ng/ml수평적TPO활성;병차재HFCL/TPO지지하,CD34+조혈세포경과7 d확증후,CD34+CD41+세포적비례위(13.7±2.0)%,HFCL위(6.5±1.8)%(P＜0.01);CD41+CD61+세포적비례위(11.9±0.7)%,략고우HFCL적(10.6±1.5)%(P＞0.05).결론기질세포능구유효표체외원성TPO기인화기단백,이차TPO기인수식적기질세포능현저촉진CD34+CD41+거핵조세포적확증,단대교성숙적CD41+CD61+거핵세포영향불명현.
