现代临床医学生物工程学杂志
現代臨床醫學生物工程學雜誌
현대림상의학생물공정학잡지
2002年
6期
393-397
,共5页
林文珍%舒雨雁%庄茂辛%林政炯%吴祥甫%周元聪
林文珍%舒雨雁%莊茂辛%林政炯%吳祥甫%週元聰
림문진%서우안%장무신%림정형%오상보%주원총
眼镜王蛇毒%磷脂酶A2%基因%克隆
眼鏡王蛇毒%燐脂酶A2%基因%剋隆
안경왕사독%린지매A2%기인%극륭
目的研究广西眼镜王蛇毒杂合性酸性磷脂酶A2(APLA2)的基因克隆与序列分析.方法从广西眼镜王蛇毒腺中提取总RNA,根据种属关系接近的台湾眼镜蛇毒APLA2两端非翻译区的保守序列设计引物,利用RT-PCR进行体外扩增,获得磷脂酶A2基因,克隆至pMD18-T载体,经测序筛选出APLA2-1,APLA2-2及一个新的酸性磷脂酶A2(命名为APLA2-3).根据测序结果确定了APLA2-3基因的全序列,并由此推导编码的氨基酸序列. 结果利用Antheprot 4.3c蛋白质序列分析软件包计算它的等电点为4.885,相对分子质量为16.543kD,并预测了它的二级结构和部分理化性质.同源性比较表明,APLA2-3的1～39位氨基酸残基序列与APLA2-2相同,其同源性为64%,而40～108位氨基酸残基序列与APLA2-1相同,其同源性为69%,109位氨基酸残基序列皆不同于这两种APLA2.结论 揭示了APLA2具有基因多样性,可能与物种进化和生物活性有关,并为进一步研究PLA2的结构与功能的关系提供更多的信息.
目的研究廣西眼鏡王蛇毒雜閤性痠性燐脂酶A2(APLA2)的基因剋隆與序列分析.方法從廣西眼鏡王蛇毒腺中提取總RNA,根據種屬關繫接近的檯灣眼鏡蛇毒APLA2兩耑非翻譯區的保守序列設計引物,利用RT-PCR進行體外擴增,穫得燐脂酶A2基因,剋隆至pMD18-T載體,經測序篩選齣APLA2-1,APLA2-2及一箇新的痠性燐脂酶A2(命名為APLA2-3).根據測序結果確定瞭APLA2-3基因的全序列,併由此推導編碼的氨基痠序列. 結果利用Antheprot 4.3c蛋白質序列分析軟件包計算它的等電點為4.885,相對分子質量為16.543kD,併預測瞭它的二級結構和部分理化性質.同源性比較錶明,APLA2-3的1～39位氨基痠殘基序列與APLA2-2相同,其同源性為64%,而40～108位氨基痠殘基序列與APLA2-1相同,其同源性為69%,109位氨基痠殘基序列皆不同于這兩種APLA2.結論 揭示瞭APLA2具有基因多樣性,可能與物種進化和生物活性有關,併為進一步研究PLA2的結構與功能的關繫提供更多的信息.
목적연구엄서안경왕사독잡합성산성린지매A2(APLA2)적기인극륭여서렬분석.방법종엄서안경왕사독선중제취총RNA,근거충속관계접근적태만안경사독APLA2량단비번역구적보수서렬설계인물,이용RT-PCR진행체외확증,획득린지매A2기인,극륭지pMD18-T재체,경측서사선출APLA2-1,APLA2-2급일개신적산성린지매A2(명명위APLA2-3).근거측서결과학정료APLA2-3기인적전서렬,병유차추도편마적안기산서렬. 결과이용Antheprot 4.3c단백질서렬분석연건포계산타적등전점위4.885,상대분자질량위16.543kD,병예측료타적이급결구화부분이화성질.동원성비교표명,APLA2-3적1～39위안기산잔기서렬여APLA2-2상동,기동원성위64%,이40～108위안기산잔기서렬여APLA2-1상동,기동원성위69%,109위안기산잔기서렬개불동우저량충APLA2.결론 게시료APLA2구유기인다양성,가능여물충진화화생물활성유관,병위진일보연구PLA2적결구여공능적관계제공경다적신식.
