蚕桑通报
蠶桑通報
잠상통보
BULLETIN OF SERICULTURE
2011年
4期
8-11
,共4页
李光才%蔡顺风%何祥康%何欣怡%马焕艳%孟祥坤%邱海洪%何永强%鲁兴萌
李光纔%蔡順風%何祥康%何訢怡%馬煥豔%孟祥坤%邱海洪%何永彊%魯興萌
리광재%채순풍%하상강%하흔이%마환염%맹상곤%구해홍%하영강%로흥맹
家蚕微粒子病%孢子%聚合酶链式反应%检测%灵敏度
傢蠶微粒子病%孢子%聚閤酶鏈式反應%檢測%靈敏度
가잠미입자병%포자%취합매련식반응%검측%령민도
Silkworm Pebrine disease%Spore%PCR%Detection%Sensitivity
蚕微粒子病检测技术是该病防治中的一项重要技术,本文在通过破碎法提高模板核酸获取量的基础上,对纯化家蚕微粒子虫孢子的PCR检测灵敏度进行了测试。提取核酸-模板稀释测试12对引物的灵敏度中有4对引物达到0.05粒(10^2粒/mL)、4对引物5粒(10^4粒/mL)、1对引物50粒(10^5粒/mL)、2对引物500粒(10^6粒/mL)和1对引物5000粒(10^7粒/mL)。两对灵敏度较高的引物(NbZS004F/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R)灵敏度临界值(0.05粒和0.005粒)的PCR重复检测率均为90%。纯化家蚕微粒子虫孢子稀释后提取核酸再进行PCR检测试验中,NbZS00aF/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R的灵敏度分别为:5粒(10^4粒/mL)和0.5粒(10^3粒/mL)。
蠶微粒子病檢測技術是該病防治中的一項重要技術,本文在通過破碎法提高模闆覈痠穫取量的基礎上,對純化傢蠶微粒子蟲孢子的PCR檢測靈敏度進行瞭測試。提取覈痠-模闆稀釋測試12對引物的靈敏度中有4對引物達到0.05粒(10^2粒/mL)、4對引物5粒(10^4粒/mL)、1對引物50粒(10^5粒/mL)、2對引物500粒(10^6粒/mL)和1對引物5000粒(10^7粒/mL)。兩對靈敏度較高的引物(NbZS004F/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R)靈敏度臨界值(0.05粒和0.005粒)的PCR重複檢測率均為90%。純化傢蠶微粒子蟲孢子稀釋後提取覈痠再進行PCR檢測試驗中,NbZS00aF/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R的靈敏度分彆為:5粒(10^4粒/mL)和0.5粒(10^3粒/mL)。
잠미입자병검측기술시해병방치중적일항중요기술,본문재통과파쇄법제고모판핵산획취량적기출상,대순화가잠미입자충포자적PCR검측령민도진행료측시。제취핵산-모판희석측시12대인물적령민도중유4대인물체도0.05립(10^2립/mL)、4대인물5립(10^4립/mL)、1대인물50립(10^5립/mL)、2대인물500립(10^6립/mL)화1대인물5000립(10^7립/mL)。량대령민도교고적인물(NbZS004F/NbZS004R화NbZS007F/NbZS007R)령민도림계치(0.05립화0.005립)적PCR중복검측솔균위90%。순화가잠미입자충포자희석후제취핵산재진행PCR검측시험중,NbZS00aF/NbZS004R화NbZS007F/NbZS007R적령민도분별위:5립(10^4립/mL)화0.5립(10^3립/mL)。
Silkworm pebrine disease detection technology is an important technique in the prevention and treatment for pebrine. Based on the higher DNA recovery by acid-washed glass beads treatment, detection sensitivity of PCR method for purified Nosema bombycis spores was tested. In DNA extraction - template dilution test, sensitivity of 12 pairs of primers are as follows: 4 pairs of primers are 0.05 spore (10^2 spore/mL), 4 pairs of primers are 5 spores (10^4 spore/mL), 1 pair of primers is 50 spores (10^5 spore/ mL), 2 pairs of primers are 500 spores (10^6 spore/mL), 1 pair of primers is 5000 spores (10^7 spore/mL). The repeatability of sensitivity thresholds of NbZSO04F/NbZS004R (0.05) and NbZS007F/NbZS007R (0.005) was 90%. In spore dilution - DNA extraction test, detection sensitivity of NbZS004F/NbZS004R and NbZS007F / NbZS007R are 5 spores (10^4 spore/mL) and 0.5 spores (10^3 spore/mL), respectively.