广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
11期
154-157
,共4页
姚晓辉%李华强%陈瑞爱%练炳洲%王林川%邓月嫦%王凤国
姚曉輝%李華彊%陳瑞愛%練炳洲%王林川%鄧月嫦%王鳳國
요효휘%리화강%진서애%련병주%왕림천%산월항%왕봉국
BVDV%荧光RT-PCR%检测方法
BVDV%熒光RT-PCR%檢測方法
BVDV%형광RT-PCR%검측방법
根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)毒株序列,选择5'NTR保守区域设计1对特异性引物和1条Tagnum探针,通过矩阵法筛选引物探针的最佳浓度,建立了检测BVDV的荧光RT-PCR方法.结果显示,用1.5μL上下游引物混合液(10 μmol/L)和0.5 μL探针溶液(10 μmol/L)对BVDV进行检测,可获得较小Ct值、较高吸光值,并可降低检测成本.对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验,结果表明,该方法敏感性高、特异性强、重复性好.将该方法应用在疫苗生产中,可快速准确地筛选出合格的原辅材料和半成品,为生产提供及时准确可靠的数据.
根據GenBank中登錄的牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)毒株序列,選擇5'NTR保守區域設計1對特異性引物和1條Tagnum探針,通過矩陣法篩選引物探針的最佳濃度,建立瞭檢測BVDV的熒光RT-PCR方法.結果顯示,用1.5μL上下遊引物混閤液(10 μmol/L)和0.5 μL探針溶液(10 μmol/L)對BVDV進行檢測,可穫得較小Ct值、較高吸光值,併可降低檢測成本.對該方法進行特異性、敏感性和重複性試驗,結果錶明,該方法敏感性高、特異性彊、重複性好.將該方法應用在疫苗生產中,可快速準確地篩選齣閤格的原輔材料和半成品,為生產提供及時準確可靠的數據.
근거GenBank중등록적우병독성복사병독(BVDV)독주서렬,선택5'NTR보수구역설계1대특이성인물화1조Tagnum탐침,통과구진법사선인물탐침적최가농도,건립료검측BVDV적형광RT-PCR방법.결과현시,용1.5μL상하유인물혼합액(10 μmol/L)화0.5 μL탐침용액(10 μmol/L)대BVDV진행검측,가획득교소Ct치、교고흡광치,병가강저검측성본.대해방법진행특이성、민감성화중복성시험,결과표명,해방법민감성고、특이성강、중복성호.장해방법응용재역묘생산중,가쾌속준학지사선출합격적원보재료화반성품,위생산제공급시준학가고적수거.
