检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2011年
9期
610-614
,共5页
张薇薇%张军%方超平%沈茜
張薇薇%張軍%方超平%瀋茜
장미미%장군%방초평%침천
流式细胞术%CD55%CD59%红细胞%阵发性睡眠性血红蛋白尿
流式細胞術%CD55%CD59%紅細胞%陣髮性睡眠性血紅蛋白尿
류식세포술%CD55%CD59%홍세포%진발성수면성혈홍단백뇨
目的 探讨流式细胞仪测定红细胞表面CD55、CD59试验过程中影响检测的若干因素,建立此项目的 标准操作程序.方法 利用流式细胞仪对15例非血液病、11例阵发性血红蛋白尿症(PNH)的乙二胺四乙酸(EDTA)外周抗凝血进行红细胞CD55、CD59检测,观察单克隆抗体(mAb)用量、荧光素种类及反应时间对测定结果的影响.结果 在未饱和抗原的情况下(<9 μL),平均荧光强度(MFI)随抗体量的增加而升高.CD55-异硫氰酸荧光素(FITC)的阳性率和MFI均低于CD55-藻红蛋白(PE),CD59的FITC和PE 2种荧光标记的阳性率间差异无统计学意义,但在MFI方面前者明显高于后者.反应时间对CD55-PE阳性率、CD59-FITC和CD55-PE的MFI有明显影响(P<0.05);3 h内2组CD59-FITC的阳性率无明显变化.结论 抗体用量、荧光素种类及标记模式和温育时间对流式细胞仪检测红细胞CD55、CD59有明显的影响.本实验室在3个影响因素上分别选择12μL抗体标记1.6×10(5)～2.8×10(5)个红细胞、荧光素组合模式为CD59-FITC、CD55-PE双色标记和40 min的温育时间,这样既确保了反应充分又提高了结果的稳定性.
目的 探討流式細胞儀測定紅細胞錶麵CD55、CD59試驗過程中影響檢測的若榦因素,建立此項目的 標準操作程序.方法 利用流式細胞儀對15例非血液病、11例陣髮性血紅蛋白尿癥(PNH)的乙二胺四乙痠(EDTA)外週抗凝血進行紅細胞CD55、CD59檢測,觀察單剋隆抗體(mAb)用量、熒光素種類及反應時間對測定結果的影響.結果 在未飽和抗原的情況下(<9 μL),平均熒光彊度(MFI)隨抗體量的增加而升高.CD55-異硫氰痠熒光素(FITC)的暘性率和MFI均低于CD55-藻紅蛋白(PE),CD59的FITC和PE 2種熒光標記的暘性率間差異無統計學意義,但在MFI方麵前者明顯高于後者.反應時間對CD55-PE暘性率、CD59-FITC和CD55-PE的MFI有明顯影響(P<0.05);3 h內2組CD59-FITC的暘性率無明顯變化.結論 抗體用量、熒光素種類及標記模式和溫育時間對流式細胞儀檢測紅細胞CD55、CD59有明顯的影響.本實驗室在3箇影響因素上分彆選擇12μL抗體標記1.6×10(5)～2.8×10(5)箇紅細胞、熒光素組閤模式為CD59-FITC、CD55-PE雙色標記和40 min的溫育時間,這樣既確保瞭反應充分又提高瞭結果的穩定性.
목적 탐토류식세포의측정홍세포표면CD55、CD59시험과정중영향검측적약간인소,건립차항목적 표준조작정서.방법 이용류식세포의대15례비혈액병、11례진발성혈홍단백뇨증(PNH)적을이알사을산(EDTA)외주항응혈진행홍세포CD55、CD59검측,관찰단극륭항체(mAb)용량、형광소충류급반응시간대측정결과적영향.결과 재미포화항원적정황하(<9 μL),평균형광강도(MFI)수항체량적증가이승고.CD55-이류청산형광소(FITC)적양성솔화MFI균저우CD55-조홍단백(PE),CD59적FITC화PE 2충형광표기적양성솔간차이무통계학의의,단재MFI방면전자명현고우후자.반응시간대CD55-PE양성솔、CD59-FITC화CD55-PE적MFI유명현영향(P<0.05);3 h내2조CD59-FITC적양성솔무명현변화.결론 항체용량、형광소충류급표기모식화온육시간대류식세포의검측홍세포CD55、CD59유명현적영향.본실험실재3개영향인소상분별선택12μL항체표기1.6×10(5)～2.8×10(5)개홍세포、형광소조합모식위CD59-FITC、CD55-PE쌍색표기화40 min적온육시간,저양기학보료반응충분우제고료결과적은정성.
