色谱
色譜
색보
CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY
2011年
4期
330-334
,共5页
韩晓菲%玉龙星%杨乾栩%肖红斌
韓曉菲%玉龍星%楊乾栩%肖紅斌
한효비%옥룡성%양건허%초홍빈
高效液相色谱%氨基酸消耗谱%紫杉醇%丝裂霉素%HeLa细胞%代谢组学
高效液相色譜%氨基痠消耗譜%紫杉醇%絲裂黴素%HeLa細胞%代謝組學
고효액상색보%안기산소모보%자삼순%사렬매소%HeLa세포%대사조학
以邻苯二甲醛为衍生试剂,正缬氨酸为内标,采用柱前在线衍生高效液相色谱(HPLC)分离,荧光检测(FLD)的方法,建立了培养基中游离氨基酸(FAA)代谢消耗谱的定量分析方法.流动相A液为10 mmol/L Na2HPO4-Na2B4O7缓冲液(pH 7.95),B液为乙腈-甲醇-水(45:45:10,v/v/v);二元线性梯度洗脱,流动相B在35 min内由5%升至52%,33 min内17种FAA全部得到良好分离.应用该方法分别测定了HeLa细胞在紫杉醇和丝裂霉素干预24 h后的培养基氨基酸代谢消耗谱(以正常培养组为对照).以相对峰面积作为原始数据.通过Matlab7.1软件平台,用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)得分图进行关联研究,结果表明:与对照组相比,培养基游离氨基酸代谢消耗谱能够区分两种不同机制的抗癌药物,为抗癌药物筛选过程中的药物作用机制预归类提供了一种新的技术方法.同时,这种以外观内的方法具有方便、经济的特点.
以鄰苯二甲醛為衍生試劑,正纈氨痠為內標,採用柱前在線衍生高效液相色譜(HPLC)分離,熒光檢測(FLD)的方法,建立瞭培養基中遊離氨基痠(FAA)代謝消耗譜的定量分析方法.流動相A液為10 mmol/L Na2HPO4-Na2B4O7緩遲液(pH 7.95),B液為乙腈-甲醇-水(45:45:10,v/v/v);二元線性梯度洗脫,流動相B在35 min內由5%升至52%,33 min內17種FAA全部得到良好分離.應用該方法分彆測定瞭HeLa細胞在紫杉醇和絲裂黴素榦預24 h後的培養基氨基痠代謝消耗譜(以正常培養組為對照).以相對峰麵積作為原始數據.通過Matlab7.1軟件平檯,用偏最小二乘判彆分析(PLS-DA)得分圖進行關聯研究,結果錶明:與對照組相比,培養基遊離氨基痠代謝消耗譜能夠區分兩種不同機製的抗癌藥物,為抗癌藥物篩選過程中的藥物作用機製預歸類提供瞭一種新的技術方法.同時,這種以外觀內的方法具有方便、經濟的特點.
이린분이갑철위연생시제,정힐안산위내표,채용주전재선연생고효액상색보(HPLC)분리,형광검측(FLD)적방법,건립료배양기중유리안기산(FAA)대사소모보적정량분석방법.류동상A액위10 mmol/L Na2HPO4-Na2B4O7완충액(pH 7.95),B액위을정-갑순-수(45:45:10,v/v/v);이원선성제도세탈,류동상B재35 min내유5%승지52%,33 min내17충FAA전부득도량호분리.응용해방법분별측정료HeLa세포재자삼순화사렬매소간예24 h후적배양기안기산대사소모보(이정상배양조위대조).이상대봉면적작위원시수거.통과Matlab7.1연건평태,용편최소이승판별분석(PLS-DA)득분도진행관련연구,결과표명:여대조조상비,배양기유리안기산대사소모보능구구분량충불동궤제적항암약물,위항암약물사선과정중적약물작용궤제예귀류제공료일충신적기술방법.동시,저충이외관내적방법구유방편、경제적특점.