CAJ | 학술논문

本文主要探讨了不同精子处理对应用显微授精介导(intracytoplasmic sperm injection-mediated transgenesis,ICSI-Tr)生产转基因水牛胚胎效率的影响.本试验以p18T-BCN5.2-IFN-1.1pA-EGFP为载体,比较了精子的不同处理方式(NaOH和冻融)、NaOH处理精子不同时间(5 min,10 min,20 min,30 min和60 min)以及不同外源DNA浓度(5 ng/μL,10 ng/μL,25 ng/μL和50 ng/μL)对ICSI-Tr转基因效率的影响.结果显示:NaOH处理组的囊胚EGFP表达率(46.1%),与冻融精子处理组(47.1%)差异不显著,但发育率显著高于冻融处理精子组(28.3% vs 16.7%,P<0.05).处理60 min组和30 min组的分裂率分别为78.9%和77.5%,显著高于20 min、10 min和5 min组的64.0%、60.0%和64.0% (P<0.05),其中30 min处理组的囊胚EGFP表达率高达44.4%,显著高于其它处理组(P<0.05).25 ng/μL组和50 ng/μL组的早期胚胎EGFP表达效率差异不显著(41.3% vs 42.5%),但显著高于5 ng/μL组和10 ng/μL组(22.5%和35.5%),25 ng/μL组的囊胚EGFP表达效率显著高于其它组(P<0.05).本研究优化了应用ICSI-Tr生产转基因水牛胚胎技术体系,为获得ICSI-Tr转基因水牛奠定了良好的工作基础.
본문주요탐토료불동정자처리대응용현미수정개도(intracytoplasmic sperm injection-mediated transgenesis,ICSI-Tr)생산전기인수우배태효솔적영향.본시험이p18T-BCN5.2-IFN-1.1pA-EGFP위재체,비교료정자적불동처리방식(NaOH화동융)、NaOH처리정자불동시간(5 min,10 min,20 min,30 min화60 min)이급불동외원DNA농도(5 ng/μL,10 ng/μL,25 ng/μL화50 ng/μL)대ICSI-Tr전기인효솔적영향.결과현시:NaOH처리조적낭배EGFP표체솔(46.1%),여동융정자처리조(47.1%)차이불현저,단발육솔현저고우동융처리정자조(28.3% vs 16.7%,P<0.05).처리60 min조화30 min조적분렬솔분별위78.9%화77.5%,현저고우20 min、10 min화5 min조적64.0%、60.0%화64.0% (P<0.05),기중30 min처리조적낭배EGFP표체솔고체44.4%,현저고우기타처리조(P<0.05).25 ng/μL조화50 ng/μL조적조기배태EGFP표체효솔차이불현저(41.3% vs 42.5%),단현저고우5 ng/μL조화10 ng/μL조(22.5%화35.5%),25 ng/μL조적낭배EGFP표체효솔현저고우기타조(P<0.05).본연구우화료응용ICSI-Tr생산전기인수우배태기술체계,위획득ICSI-Tr전기인수우전정료량호적공작기출.