CAJ | 학술논문

背景:骨髓间充质干细胞是最好的组织工程种子细胞来源,含有血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF165)不仅对血管再生和启动成骨修复有重要意义,其持续稳定的释放还能够提高新生骨的矿化程度,增强修复组织的力学性能.目的:观察hVEGF165基因转染的兔骨髓间充质干细胞分泌血管内皮生长因子的蛋白功能.方法:体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞,纯化并鉴定兔骨髓间充质干细胞;免疫荧光法检测细胞表面标志;传代培养后的骨髓间充质干细胞以pcDNA3.1-VEGF165质粒和脂质体1∶3比例的混合液转染,并分为3组:转染组应用pcDNA3.1-VEGF165转染细胞,空载体转染组应用pcDNA3.1-空载体转染,未转染组不处理.通过ELISA和Western-blot检测转染后细胞中外源性血管内皮生长因子的表达.结果与结论:转染组与其他两组比较,VEGF165蛋白含量显著增高,差异有显著性意义(P < 0.05),但空载体转染组与未转染组之间差异无显著性意义(P > 0.05),转染组不同时间点之间VEGF165蛋白含量差异均有显著性意义(P < 0.05),hVEGF165基因转染的骨髓间充质干细胞能成功分泌VEGF165蛋白.提示采用基因转染技术可将hVEGF165基因转染到骨髓间充质干细胞中并可有效表达具有生物活性的VEGF165.
배경:골수간충질간세포시최호적조직공정충자세포래원,함유혈관내피생장인자165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF165)불부대혈관재생화계동성골수복유중요의의,기지속은정적석방환능구제고신생골적광화정도,증강수복조직적역학성능.목적:관찰hVEGF165기인전염적토골수간충질간세포분비혈관내피생장인자적단백공능.방법:체외분리、배양토골수간충질간세포,순화병감정토골수간충질간세포;면역형광법검측세포표면표지;전대배양후적골수간충질간세포이pcDNA3.1-VEGF165질립화지질체1∶3비례적혼합액전염,병분위3조:전염조응용pcDNA3.1-VEGF165전염세포,공재체전염조응용pcDNA3.1-공재체전염,미전염조불처리.통과ELISA화Western-blot검측전염후세포중외원성혈관내피생장인자적표체.결과여결론:전염조여기타량조비교,VEGF165단백함량현저증고,차이유현저성의의(P < 0.05),단공재체전염조여미전염조지간차이무현저성의의(P > 0.05),전염조불동시간점지간VEGF165단백함량차이균유현저성의의(P < 0.05),hVEGF165기인전염적골수간충질간세포능성공분비VEGF165단백.제시채용기인전염기술가장hVEGF165기인전염도골수간충질간세포중병가유효표체구유생물활성적VEGF165.