基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2011年
2期
136-144
,共9页
蔺晓丽%徐胜娟%刘应保%郭建春%王瑶
藺曉麗%徐勝娟%劉應保%郭建春%王瑤
린효려%서성연%류응보%곽건춘%왕요
根癌农杆菌%ClpⅤ型ATPase基因%酶学活性%突变分析
根癌農桿菌%ClpⅤ型ATPase基因%酶學活性%突變分析
근암농간균%ClpⅤ형ATPase기인%매학활성%돌변분석
细菌Ⅵ型分泌系统(type Ⅵ secretion system,T6SS)是近年发现的一种分布广泛且与细菌致病性密切相关的新型分泌系统,ClpⅤ型ATPase是不同细菌T6SS中均含有的关键保守组分,据推测可能为底物蛋白的分泌提供动力,但对其生化功能尚未进行深入鉴定.在本研究中,我们克隆了根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) C58中的ClpⅤ型ATPase基因atu4344并在大肠杆菌中表达,酶学检测证实了其ATPase活性,定点突变分析发现K232/608和E299/675突变体均丧失ATPase活性,表明Walker A模体和Walker B模体与其活性密切相关.这是首次对植物病原细菌T6SS中的ClpⅤ型ATPase进行生化鉴定和突变分析研究.
細菌Ⅵ型分泌繫統(type Ⅵ secretion system,T6SS)是近年髮現的一種分佈廣汎且與細菌緻病性密切相關的新型分泌繫統,ClpⅤ型ATPase是不同細菌T6SS中均含有的關鍵保守組分,據推測可能為底物蛋白的分泌提供動力,但對其生化功能尚未進行深入鑒定.在本研究中,我們剋隆瞭根癌農桿菌(Agrobacterium tumefaciens) C58中的ClpⅤ型ATPase基因atu4344併在大腸桿菌中錶達,酶學檢測證實瞭其ATPase活性,定點突變分析髮現K232/608和E299/675突變體均喪失ATPase活性,錶明Walker A模體和Walker B模體與其活性密切相關.這是首次對植物病原細菌T6SS中的ClpⅤ型ATPase進行生化鑒定和突變分析研究.
세균Ⅵ형분비계통(type Ⅵ secretion system,T6SS)시근년발현적일충분포엄범차여세균치병성밀절상관적신형분비계통,ClpⅤ형ATPase시불동세균T6SS중균함유적관건보수조분,거추측가능위저물단백적분비제공동력,단대기생화공능상미진행심입감정.재본연구중,아문극륭료근암농간균(Agrobacterium tumefaciens) C58중적ClpⅤ형ATPase기인atu4344병재대장간균중표체,매학검측증실료기ATPase활성,정점돌변분석발현K232/608화E299/675돌변체균상실ATPase활성,표명Walker A모체화Walker B모체여기활성밀절상관.저시수차대식물병원세균T6SS중적ClpⅤ형ATPase진행생화감정화돌변분석연구.