中国骨质疏松杂志
中國骨質疏鬆雜誌
중국골질소송잡지
CHINESE JOURNAL OF OSTEOPOROSIS
2008年
12期
849-853
,共5页
陈锚锚%苏楠%赵子瑜%雷子贤%赵玲%李福兵%陈林
陳錨錨%囌楠%趙子瑜%雷子賢%趙玲%李福兵%陳林
진묘묘%소남%조자유%뢰자현%조령%리복병%진림
碱性调宁蛋白%成骨细胞%转基因小鼠
堿性調寧蛋白%成骨細胞%轉基因小鼠
감성조저단백%성골세포%전기인소서
目的 为从整体动物水平研究碱性调宁蛋白(h1-calponin)在骨形成过程中的直接作用,我们构建了成骨细胞中特异性过表达h1-calponin的转基因小鼠模型,并对其表型进行了初步分析.方法 构建在成骨细胞特异性启动子(collagen I promoter)驱动下表达h1-calponin的载体(pColI-calponin),纯化DNA片段,再以显微注射的方法将转基因片段导入小鼠受精卵,经移植后得到小鼠.PCR法检测整合到小鼠基因组中的外源基因,提取F1代阳性小鼠原代成骨细胞RNA,RT-PCR检测h1-calponin在小鼠成骨细胞中的表达情况,并观察转基因小鼠表型及体重变化情况.结果 PCR检测结果显示1只G0代转基因鼠中检测到阳性信号,RT-PCR显示F1代转基因小鼠成骨细胞中表达h1-calponin较野生对照小鼠明显增加,且转基因小鼠体重与野生小鼠相比有明显降低.结论 成功构建了在成骨细胞特异性过表达h1-calponin的转基因小鼠,为深入研究h1-calponin在骨骼发育中的作用提供了良好的动物模型.
目的 為從整體動物水平研究堿性調寧蛋白(h1-calponin)在骨形成過程中的直接作用,我們構建瞭成骨細胞中特異性過錶達h1-calponin的轉基因小鼠模型,併對其錶型進行瞭初步分析.方法 構建在成骨細胞特異性啟動子(collagen I promoter)驅動下錶達h1-calponin的載體(pColI-calponin),純化DNA片段,再以顯微註射的方法將轉基因片段導入小鼠受精卵,經移植後得到小鼠.PCR法檢測整閤到小鼠基因組中的外源基因,提取F1代暘性小鼠原代成骨細胞RNA,RT-PCR檢測h1-calponin在小鼠成骨細胞中的錶達情況,併觀察轉基因小鼠錶型及體重變化情況.結果 PCR檢測結果顯示1隻G0代轉基因鼠中檢測到暘性信號,RT-PCR顯示F1代轉基因小鼠成骨細胞中錶達h1-calponin較野生對照小鼠明顯增加,且轉基因小鼠體重與野生小鼠相比有明顯降低.結論 成功構建瞭在成骨細胞特異性過錶達h1-calponin的轉基因小鼠,為深入研究h1-calponin在骨骼髮育中的作用提供瞭良好的動物模型.
목적 위종정체동물수평연구감성조저단백(h1-calponin)재골형성과정중적직접작용,아문구건료성골세포중특이성과표체h1-calponin적전기인소서모형,병대기표형진행료초보분석.방법 구건재성골세포특이성계동자(collagen I promoter)구동하표체h1-calponin적재체(pColI-calponin),순화DNA편단,재이현미주사적방법장전기인편단도입소서수정란,경이식후득도소서.PCR법검측정합도소서기인조중적외원기인,제취F1대양성소서원대성골세포RNA,RT-PCR검측h1-calponin재소서성골세포중적표체정황,병관찰전기인소서표형급체중변화정황.결과 PCR검측결과현시1지G0대전기인서중검측도양성신호,RT-PCR현시F1대전기인소서성골세포중표체h1-calponin교야생대조소서명현증가,차전기인소서체중여야생소서상비유명현강저.결론 성공구건료재성골세포특이성과표체h1-calponin적전기인소서,위심입연구h1-calponin재골격발육중적작용제공료량호적동물모형.
