上海交通大学学报
上海交通大學學報
상해교통대학학보
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY
2008年
9期
1448-1452
,共5页
朱冬青%何云龙%白林泉%邓子新
硃鼕青%何雲龍%白林泉%鄧子新
주동청%하운룡%백림천%산자신
阿维链霉菌%阿维菌素%调节%寡霉素
阿維鏈黴菌%阿維菌素%調節%寡黴素
아유련매균%아유균소%조절%과매소
aveR是阿维链霉菌NRRL 8165阿维菌素生物合成基因簇中唯一可能的调节基因.为了验证aveR是否参与阿维菌素生物合成基因的转录调节,构建了用于敲除aveR的基因置换质粒pJTU2530,并通过接合转移引入了阿维链霉菌.通过筛选ThioSAprR转化子,经聚合酶链式反应(PCR)扩增验证,获得了aveR内部1 320 bp区域被阿泊拉霉素抗性基因aac(3)Ⅳ替换的突变株ZD10.高压液相色谱检测表明,与野生型菌株相比,突变株ZD10不再产生阿维菌素,并且ZD10中寡霉素的产量明显高于野生型菌株.进一步的反转录PCR(RT-PCR)分析表明,与野生型菌株相比,突变株ZD10的聚酮合酶基因aveA3不再转录.结果显示,AveR是阿维菌素生物合成的正调节因子,通过调节结构基因的转录表达来影响阿维菌素的产生.
aveR是阿維鏈黴菌NRRL 8165阿維菌素生物閤成基因簇中唯一可能的調節基因.為瞭驗證aveR是否參與阿維菌素生物閤成基因的轉錄調節,構建瞭用于敲除aveR的基因置換質粒pJTU2530,併通過接閤轉移引入瞭阿維鏈黴菌.通過篩選ThioSAprR轉化子,經聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增驗證,穫得瞭aveR內部1 320 bp區域被阿泊拉黴素抗性基因aac(3)Ⅳ替換的突變株ZD10.高壓液相色譜檢測錶明,與野生型菌株相比,突變株ZD10不再產生阿維菌素,併且ZD10中寡黴素的產量明顯高于野生型菌株.進一步的反轉錄PCR(RT-PCR)分析錶明,與野生型菌株相比,突變株ZD10的聚酮閤酶基因aveA3不再轉錄.結果顯示,AveR是阿維菌素生物閤成的正調節因子,通過調節結構基因的轉錄錶達來影響阿維菌素的產生.
aveR시아유련매균NRRL 8165아유균소생물합성기인족중유일가능적조절기인.위료험증aveR시부삼여아유균소생물합성기인적전록조절,구건료용우고제aveR적기인치환질립pJTU2530,병통과접합전이인입료아유련매균.통과사선ThioSAprR전화자,경취합매련식반응(PCR)확증험증,획득료aveR내부1 320 bp구역피아박랍매소항성기인aac(3)Ⅳ체환적돌변주ZD10.고압액상색보검측표명,여야생형균주상비,돌변주ZD10불재산생아유균소,병차ZD10중과매소적산량명현고우야생형균주.진일보적반전록PCR(RT-PCR)분석표명,여야생형균주상비,돌변주ZD10적취동합매기인aveA3불재전록.결과현시,AveR시아유균소생물합성적정조절인자,통과조절결구기인적전록표체래영향아유균소적산생.
