CAJ | 학술논문

目的:建立PC12细胞的神经元样细胞分化模型,并探讨ERK蛋白在PC12细胞神经元样细胞分化中的可能机制.方法:以10、20、50 μg/L的NGF(NGF溶于PBS,培养基中PBS的终浓度不超过2%)培养PC12细胞,应用倒置相差显微镜.显微镜测微尺及流式细胞仪鉴定PC12细胞的分化,以确定NGF使用剂量.运用免疫印迹检测不同浓度、不同作用时间时ERK蛋白在PC12细胞中的表达,并进行统计学分析.结果:随NGF剂量的升高,PC12细胞的体积、最长突起长度和突起数目均会增大或增多.统计学分析证明50 μg/L的NFG作用48 h足以诱导PC12细胞的交感神经样改变.尽管ERK总蛋白水平在NFG作用前后无明显改变,但在NFG作用5 min后磷酸化的ERK蛋白水平即显著升高,达到峰值,并持续约1 h.50 μg/L的NFG作用于PC12细胞48h可使细胞发生明显的G1期阻滞.结论:PC12细胞可在NGF作用下出现交感神经样改变,并且细胞的分化程度依赖于NGF的使用剂量和作用时间.在NGF诱导的PC12细胞神经元样分化中ERK蛋白的磷酸化对NGF呈现剂量和时间依赖性,提示ERK蛋白在分化的早期发挥重要作用.
목적:건립PC12세포적신경원양세포분화모형,병탐토ERK단백재PC12세포신경원양세포분화중적가능궤제.방법:이10、20、50 μg/L적NGF(NGF용우PBS,배양기중PBS적종농도불초과2%)배양PC12세포,응용도치상차현미경.현미경측미척급류식세포의감정PC12세포적분화,이학정NGF사용제량.운용면역인적검측불동농도、불동작용시간시ERK단백재PC12세포중적표체,병진행통계학분석.결과:수NGF제량적승고,PC12세포적체적、최장돌기장도화돌기수목균회증대혹증다.통계학분석증명50 μg/L적NFG작용48 h족이유도PC12세포적교감신경양개변.진관ERK총단백수평재NFG작용전후무명현개변,단재NFG작용5 min후린산화적ERK단백수평즉현저승고,체도봉치,병지속약1 h.50 μg/L적NFG작용우PC12세포48h가사세포발생명현적G1기조체.결론:PC12세포가재NGF작용하출현교감신경양개변,병차세포적분화정도의뢰우NGF적사용제량화작용시간.재NGF유도적PC12세포신경원양분화중ERK단백적린산화대NGF정현제량화시간의뢰성,제시ERK단백재분화적조기발휘중요작용.