四川大学学报(医学版)
四川大學學報(醫學版)
사천대학학보(의학판)
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2008年
3期
368-372
,共5页
石娅莉%鲍朗%商正玲%姚素霞
石婭莉%鮑朗%商正玲%姚素霞
석아리%포랑%상정령%요소하
结核分枝杆菌%RelE%生长抑制%凋亡
結覈分枝桿菌%RelE%生長抑製%凋亡
결핵분지간균%RelE%생장억제%조망
目的 探索结核分枝杆菌RelE毒素蛋白是否对肺癌A-549细胞有生长抑制作用.方法 采用PCR技术克隆结核分枝杆菌RelE、RelB、RelBE基因,分别构建真核质粒PcDNA3.1-RelE、PcDNA3.1-RelB和PcDNA3.1-RelBE.经酶切分析和DNA测序证实重组质粒构建成功后,采用脂质体转染方法分别转入肺癌A-549细胞,经RT-PCR鉴定后,建立稳定表达相关蛋白的细胞株.通过细胞生长曲线、活细胞蛋白含量测定、MTT细胞增殖实验、HE染色观察细胞凋亡、流式细胞术检测瞬时转染细胞的凋亡率等,观察结核分枝杆菌RelE毒素蛋白是否对肺癌A-549细胞具有生长抑制和促凋亡的作用.结果 结核分枝杆菌RelE毒素蛋白组的肺癌A-549细胞增殖速度低于其他各组,对营养缺乏更为敏感,相同范围视野下凋亡细胞多于其他各组,瞬时转染细胞的凋亡率也高于其他组(P<0.05).结论 结核分枝杆菌RelE毒素蛋白对肺癌A-549细胞具有生长抑制和促凋亡的作用.
目的 探索結覈分枝桿菌RelE毒素蛋白是否對肺癌A-549細胞有生長抑製作用.方法 採用PCR技術剋隆結覈分枝桿菌RelE、RelB、RelBE基因,分彆構建真覈質粒PcDNA3.1-RelE、PcDNA3.1-RelB和PcDNA3.1-RelBE.經酶切分析和DNA測序證實重組質粒構建成功後,採用脂質體轉染方法分彆轉入肺癌A-549細胞,經RT-PCR鑒定後,建立穩定錶達相關蛋白的細胞株.通過細胞生長麯線、活細胞蛋白含量測定、MTT細胞增殖實驗、HE染色觀察細胞凋亡、流式細胞術檢測瞬時轉染細胞的凋亡率等,觀察結覈分枝桿菌RelE毒素蛋白是否對肺癌A-549細胞具有生長抑製和促凋亡的作用.結果 結覈分枝桿菌RelE毒素蛋白組的肺癌A-549細胞增殖速度低于其他各組,對營養缺乏更為敏感,相同範圍視野下凋亡細胞多于其他各組,瞬時轉染細胞的凋亡率也高于其他組(P<0.05).結論 結覈分枝桿菌RelE毒素蛋白對肺癌A-549細胞具有生長抑製和促凋亡的作用.
목적 탐색결핵분지간균RelE독소단백시부대폐암A-549세포유생장억제작용.방법 채용PCR기술극륭결핵분지간균RelE、RelB、RelBE기인,분별구건진핵질립PcDNA3.1-RelE、PcDNA3.1-RelB화PcDNA3.1-RelBE.경매절분석화DNA측서증실중조질립구건성공후,채용지질체전염방법분별전입폐암A-549세포,경RT-PCR감정후,건립은정표체상관단백적세포주.통과세포생장곡선、활세포단백함량측정、MTT세포증식실험、HE염색관찰세포조망、류식세포술검측순시전염세포적조망솔등,관찰결핵분지간균RelE독소단백시부대폐암A-549세포구유생장억제화촉조망적작용.결과 결핵분지간균RelE독소단백조적폐암A-549세포증식속도저우기타각조,대영양결핍경위민감,상동범위시야하조망세포다우기타각조,순시전염세포적조망솔야고우기타조(P<0.05).결론 결핵분지간균RelE독소단백대폐암A-549세포구유생장억제화촉조망적작용.