CAJ | 학술논문

目的:应用激光显微切割(laser capture microdissection,LCM)结合蛋白组学技术筛查肝细胞癌(hepatocellular carcinoma ,HCC)组织及其癌旁组织的差异表达蛋白,分析二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(dimethylarginine dimethylaminohydrolase 1,DDAH-1)在肝细胞癌表达的变化. 方法:选取2003-2006年间东方肝胆外科医院原发性肝细胞癌患者的手术切除标本40例.利用LCM技术分离捕获肝癌组织及癌旁组织的肝实质细胞,应用二维凝胶电泳技术(two dimensional gel electrophoresis,2-DE)筛选全部标本共同差异表达频率>80%、差异强度>3倍的蛋白质点;应用电喷雾串联质谱(electrospray ionisation tandem mass spectrometry,ESI-MS/MS)及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)对差异蛋白点进行质谱鉴定分析;采用Western blotting及免疫组化对差异蛋白DDAH-1进行检测. 结果:2-DE筛查获得在肝癌及癌旁组织差异表达的蛋白质点共20个,通过质谱鉴定获得12个蛋白质,其中5个在肝癌组织表达上调,7个下调;这12个蛋白质与细胞代谢、增殖、分化及信号调控相关,其中的DDAH-1是参与调控一氧化氮相关通路的重要酶.Western blotting检测显示,20例标本中16例DDAH-1表达明显升高;免疫组化检测证实,10例标本DDAH-1全部呈强阳性表达. 结论:肝细胞癌组织细胞中筛查到12个差异表达蛋白质,其中的DDAH-1在肝癌组织中表达上调,其有可能在肝癌发生、发展过程中起重要作用.
목적:응용격광현미절할(laser capture microdissection,LCM)결합단백조학기술사사간세포암(hepatocellular carcinoma ,HCC)조직급기암방조직적차이표체단백,분석이갑기정안산이갑알수해매1(dimethylarginine dimethylaminohydrolase 1,DDAH-1)재간세포암표체적변화. 방법:선취2003-2006년간동방간담외과의원원발성간세포암환자적수술절제표본40례.이용LCM기술분리포획간암조직급암방조직적간실질세포,응용이유응효전영기술(two dimensional gel electrophoresis,2-DE)사선전부표본공동차이표체빈솔>80%、차이강도>3배적단백질점;응용전분무천련질보(electrospray ionisation tandem mass spectrometry,ESI-MS/MS)급기질보조격광해석전리비행시간질보(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)대차이단백점진행질보감정분석;채용Western blotting급면역조화대차이단백DDAH-1진행검측. 결과:2-DE사사획득재간암급암방조직차이표체적단백질점공20개,통과질보감정획득12개단백질,기중5개재간암조직표체상조,7개하조;저12개단백질여세포대사、증식、분화급신호조공상관,기중적DDAH-1시삼여조공일양화담상관통로적중요매.Western blotting검측현시,20례표본중16례DDAH-1표체명현승고;면역조화검측증실,10례표본DDAH-1전부정강양성표체. 결론:간세포암조직세포중사사도12개차이표체단백질,기중적DDAH-1재간암조직중표체상조,기유가능재간암발생、발전과정중기중요작용.