上海交通大学学报(医学版)
上海交通大學學報(醫學版)
상해교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2007年
10期
1181-1184
,共4页
楚玉峰%陈闻东%朱鼎良%高平进
楚玉峰%陳聞東%硃鼎良%高平進
초옥봉%진문동%주정량%고평진
血管紧张素Ⅱ%RhoA%血管外膜成纤维细胞%增殖%腺病毒
血管緊張素Ⅱ%RhoA%血管外膜成纖維細胞%增殖%腺病毒
혈관긴장소Ⅱ%RhoA%혈관외막성섬유세포%증식%선병독
目的 构建dominant negative N19RhoA重组腺病毒并感染血管外膜成纤维细胞(AF),观察RhoA对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的AF增殖的影响.方法 运用pAdEasy-1腺病毒载体系统,细菌同源重组法构建含目的基因N19RhoA的腺病毒重组质粒pAd-CMV-N19RhoA-eGFP,并感染体外培养的大鼠AF,然后用1×10-7 mol/L的AngⅡ处理24 h.Rho pull-down分析法测定RhoA活性;BrdU ELISA法检测AF的增殖情况.以同时构建的pAd-CMV-eGFP作为对照.结果 1×10-7 mol/L AngⅡ处理感染pAd-CMV-N19RhoA-eGFP的AF 30 min后,其GTP-RhoA的表达明显升高,提示AngⅡ可激活RhoA信号分子;感染pAd-CMV-N19RhoA-eGFP的AF,AngⅡ诱导的BrdU掺入明显受到抑制.结论 RhoA信号分子对AngⅡ诱导的AF增殖具有调节作用.
目的 構建dominant negative N19RhoA重組腺病毒併感染血管外膜成纖維細胞(AF),觀察RhoA對血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)誘導的AF增殖的影響.方法 運用pAdEasy-1腺病毒載體繫統,細菌同源重組法構建含目的基因N19RhoA的腺病毒重組質粒pAd-CMV-N19RhoA-eGFP,併感染體外培養的大鼠AF,然後用1×10-7 mol/L的AngⅡ處理24 h.Rho pull-down分析法測定RhoA活性;BrdU ELISA法檢測AF的增殖情況.以同時構建的pAd-CMV-eGFP作為對照.結果 1×10-7 mol/L AngⅡ處理感染pAd-CMV-N19RhoA-eGFP的AF 30 min後,其GTP-RhoA的錶達明顯升高,提示AngⅡ可激活RhoA信號分子;感染pAd-CMV-N19RhoA-eGFP的AF,AngⅡ誘導的BrdU摻入明顯受到抑製.結論 RhoA信號分子對AngⅡ誘導的AF增殖具有調節作用.
목적 구건dominant negative N19RhoA중조선병독병감염혈관외막성섬유세포(AF),관찰RhoA대혈관긴장소Ⅱ(Ang Ⅱ)유도적AF증식적영향.방법 운용pAdEasy-1선병독재체계통,세균동원중조법구건함목적기인N19RhoA적선병독중조질립pAd-CMV-N19RhoA-eGFP,병감염체외배양적대서AF,연후용1×10-7 mol/L적AngⅡ처리24 h.Rho pull-down분석법측정RhoA활성;BrdU ELISA법검측AF적증식정황.이동시구건적pAd-CMV-eGFP작위대조.결과 1×10-7 mol/L AngⅡ처리감염pAd-CMV-N19RhoA-eGFP적AF 30 min후,기GTP-RhoA적표체명현승고,제시AngⅡ가격활RhoA신호분자;감염pAd-CMV-N19RhoA-eGFP적AF,AngⅡ유도적BrdU참입명현수도억제.결론 RhoA신호분자대AngⅡ유도적AF증식구유조절작용.