农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2007年
5期
872-876
,共5页
陆秀君%郝会海%宋萍%杜克久%李国勋
陸秀君%郝會海%宋萍%杜剋久%李國勛
륙수군%학회해%송평%두극구%리국훈
营养期杀虫蛋白%vip3A-LS1基因%克隆和表达%棉铃虫%甜菜夜蛾
營養期殺蟲蛋白%vip3A-LS1基因%剋隆和錶達%棉鈴蟲%甜菜夜蛾
영양기살충단백%vip3A-LS1기인%극륭화표체%면령충%첨채야아
从土壤中分离得到营养期对鳞翅目害虫高毒的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)LS1菌株,分子检测该菌株中存在营养期杀虫蛋白基因,进行了该基因的克隆和表达.设计全长基因引物扩增得到了约2.3 kb的靶片段,序列分析证实为新vip3A基因,命名为vip3A-LSl,GenBank登录号为DQ016968,Bt基因命名委员会命名为Vip3Aa22.该基因推导蛋白与其它已知同源蛋白有8个氨基酸不同.构建vip3A-LS1基因的表达载体,SDS-PAGE检测约88 kD目的蛋白大量表达;生物测定表明,胞内可溶性蛋白对棉铃虫(Helicoverpa armigera)和甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)活性最高.纯化蛋白对初孵棉铃虫和甜菜夜蛾的LC50分别为73.6和32.2 μg/g.
從土壤中分離得到營養期對鱗翅目害蟲高毒的囌雲金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)LS1菌株,分子檢測該菌株中存在營養期殺蟲蛋白基因,進行瞭該基因的剋隆和錶達.設計全長基因引物擴增得到瞭約2.3 kb的靶片段,序列分析證實為新vip3A基因,命名為vip3A-LSl,GenBank登錄號為DQ016968,Bt基因命名委員會命名為Vip3Aa22.該基因推導蛋白與其它已知同源蛋白有8箇氨基痠不同.構建vip3A-LS1基因的錶達載體,SDS-PAGE檢測約88 kD目的蛋白大量錶達;生物測定錶明,胞內可溶性蛋白對棉鈴蟲(Helicoverpa armigera)和甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)活性最高.純化蛋白對初孵棉鈴蟲和甜菜夜蛾的LC50分彆為73.6和32.2 μg/g.
종토양중분리득도영양기대린시목해충고독적소운금아포간균(Bacillus thuringiensis,Bt)LS1균주,분자검측해균주중존재영양기살충단백기인,진행료해기인적극륭화표체.설계전장기인인물확증득도료약2.3 kb적파편단,서렬분석증실위신vip3A기인,명명위vip3A-LSl,GenBank등록호위DQ016968,Bt기인명명위원회명명위Vip3Aa22.해기인추도단백여기타이지동원단백유8개안기산불동.구건vip3A-LS1기인적표체재체,SDS-PAGE검측약88 kD목적단백대량표체;생물측정표명,포내가용성단백대면령충(Helicoverpa armigera)화첨채야아(Spodoptera exigua)활성최고.순화단백대초부면령충화첨채야아적LC50분별위73.6화32.2 μg/g.