生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2007年
9期
971-977
,共7页
孙东波%朗洪武%时洪艳%陈建飞%崔晓辰%王承宝%佟有恩%冯力
孫東波%朗洪武%時洪豔%陳建飛%崔曉辰%王承寶%佟有恩%馮力
손동파%랑홍무%시홍염%진건비%최효신%왕승보%동유은%풍력
猪流行性腹泻病毒%S蛋白%抗原表位%噬菌体展示
豬流行性腹瀉病毒%S蛋白%抗原錶位%噬菌體展示
저류행성복사병독%S단백%항원표위%서균체전시
以猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的免疫优势区S1(1～2 367 bp)为靶基因,利用基于gⅢ表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统,构建S1基因噬菌体展示肽库,以纯化病毒制备的兔抗PEDV多克隆血清为靶蛋白,对S1基因噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选,结果获得3个高亲和力的序列,分别命名为S1P1(248～280 位氨基酸)、S1P2(442～499 位氨基酸)和S1P3(697～742 位氨基酸).ELISA和蛋白质印迹结果显示,S1P1、S1P2和S1P3短肽都能被兔抗PEDV多克隆血清识别,其中S1P3反应性最强.为了进一步揭示S1P1、S1P2和S1P3短肽的抗原性,制备了3个短肽GST融合蛋白和它们串连后GST融合蛋白的单因子血清,间接免疫荧光试验(IFA)结果证实,抗S1P2-GST、S1P3-GST和S1P123-GST融合蛋白的单因子血清能够识别Vero细胞培养物中天然的PEDV.
以豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的免疫優勢區S1(1～2 367 bp)為靶基因,利用基于gⅢ錶達外源多肽的fd絲狀噬菌體展示繫統,構建S1基因噬菌體展示肽庫,以純化病毒製備的兔抗PEDV多剋隆血清為靶蛋白,對S1基因噬菌體展示肽庫進行3輪生物淘選,結果穫得3箇高親和力的序列,分彆命名為S1P1(248～280 位氨基痠)、S1P2(442～499 位氨基痠)和S1P3(697～742 位氨基痠).ELISA和蛋白質印跡結果顯示,S1P1、S1P2和S1P3短肽都能被兔抗PEDV多剋隆血清識彆,其中S1P3反應性最彊.為瞭進一步揭示S1P1、S1P2和S1P3短肽的抗原性,製備瞭3箇短肽GST融閤蛋白和它們串連後GST融閤蛋白的單因子血清,間接免疫熒光試驗(IFA)結果證實,抗S1P2-GST、S1P3-GST和S1P123-GST融閤蛋白的單因子血清能夠識彆Vero細胞培養物中天然的PEDV.
이저류행성복사병독(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S기인적면역우세구S1(1～2 367 bp)위파기인,이용기우gⅢ표체외원다태적fd사상서균체전시계통,구건S1기인서균체전시태고,이순화병독제비적토항PEDV다극륭혈청위파단백,대S1기인서균체전시태고진행3륜생물도선,결과획득3개고친화력적서렬,분별명명위S1P1(248～280 위안기산)、S1P2(442～499 위안기산)화S1P3(697～742 위안기산).ELISA화단백질인적결과현시,S1P1、S1P2화S1P3단태도능피토항PEDV다극륭혈청식별,기중S1P3반응성최강.위료진일보게시S1P1、S1P2화S1P3단태적항원성,제비료3개단태GST융합단백화타문천련후GST융합단백적단인자혈청,간접면역형광시험(IFA)결과증실,항S1P2-GST、S1P3-GST화S1P123-GST융합단백적단인자혈청능구식별Vero세포배양물중천연적PEDV.
