中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2007年
5期
749-755
,共7页
饶静静%李寿崧%黄克和%江树勋%潘群兴
饒靜靜%李壽崧%黃剋和%江樹勛%潘群興
요정정%리수숭%황극화%강수훈%반군흥
嗜水气单胞菌%hlyA基因%aerA基因%多重PCR
嗜水氣單胞菌%hlyA基因%aerA基因%多重PCR
기수기단포균%hlyA기인%aerA기인%다중PCR
致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是近年中国各地大规模流行的淡水养殖鱼类暴发性疾病的主要病原,本研究针对GenBank中登录的致病性嗜水气单胞菌的气溶素基因(hlyA)、溶血素基因(aerA)以及为气单胞菌属所特有的内参照基因16S rRNA 保守区设计了3对特异性引物,通过进行多重PCR反应体系优化,多重PCR产物的测序鉴定与特异性和敏感性实验,试图建立一种检测致病性嗜水气单胞菌的多重PCR检测方法.对8株嗜水气单胞菌、16株相关菌株进行多重PCR检测,结果显示,非致病性分离株均未扩增出毒力基因hlyA和aerA,而致病性分离株则至少含有hlyA基因;对40份送检的水产动物样品进行多重PCR检测,结果与常规微生物学检测符合率为97.5%.多重PCR检测方法具有较高的敏感性与特异性,最低可检测模板量为10 ng的样品.该方法的建立对水产动物嗜水气单胞菌病的快速诊断和分子流行病学的调查有重要意义.[中国水产科学,2007,14(5):749-755]
緻病性嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)是近年中國各地大規模流行的淡水養殖魚類暴髮性疾病的主要病原,本研究針對GenBank中登錄的緻病性嗜水氣單胞菌的氣溶素基因(hlyA)、溶血素基因(aerA)以及為氣單胞菌屬所特有的內參照基因16S rRNA 保守區設計瞭3對特異性引物,通過進行多重PCR反應體繫優化,多重PCR產物的測序鑒定與特異性和敏感性實驗,試圖建立一種檢測緻病性嗜水氣單胞菌的多重PCR檢測方法.對8株嗜水氣單胞菌、16株相關菌株進行多重PCR檢測,結果顯示,非緻病性分離株均未擴增齣毒力基因hlyA和aerA,而緻病性分離株則至少含有hlyA基因;對40份送檢的水產動物樣品進行多重PCR檢測,結果與常規微生物學檢測符閤率為97.5%.多重PCR檢測方法具有較高的敏感性與特異性,最低可檢測模闆量為10 ng的樣品.該方法的建立對水產動物嗜水氣單胞菌病的快速診斷和分子流行病學的調查有重要意義.[中國水產科學,2007,14(5):749-755]
치병성기수기단포균(Aeromonas hydrophila)시근년중국각지대규모류행적담수양식어류폭발성질병적주요병원,본연구침대GenBank중등록적치병성기수기단포균적기용소기인(hlyA)、용혈소기인(aerA)이급위기단포균속소특유적내삼조기인16S rRNA 보수구설계료3대특이성인물,통과진행다중PCR반응체계우화,다중PCR산물적측서감정여특이성화민감성실험,시도건립일충검측치병성기수기단포균적다중PCR검측방법.대8주기수기단포균、16주상관균주진행다중PCR검측,결과현시,비치병성분리주균미확증출독력기인hlyA화aerA,이치병성분리주칙지소함유hlyA기인;대40빈송검적수산동물양품진행다중PCR검측,결과여상규미생물학검측부합솔위97.5%.다중PCR검측방법구유교고적민감성여특이성,최저가검측모판량위10 ng적양품.해방법적건립대수산동물기수기단포균병적쾌속진단화분자류행병학적조사유중요의의.[중국수산과학,2007,14(5):749-755]