作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2007年
7期
1214-1218
,共5页
相对定量%标准曲线%实时荧光定量PCR%OsRDB1
相對定量%標準麯線%實時熒光定量PCR%OsRDB1
상대정량%표준곡선%실시형광정량PCR%OsRDB1
利用实时荧光定量PCR方法分析目标基因转录本之间的表达差异,目前常用的分析实验数据的有绝对定量和相对定量方法.为了克服绝对定量方法的繁琐和简化相对定量的分析方法,分别利用2-ΔΔCt、2-ΔCt和标准曲线法对水稻OsRDB1基因在不同化学试剂和激素处理下的表达差异进行了分析,发现2-ΔΔCt必须引入标准的看家基因作为参考,计算方法繁琐,计算结果受扩增效率影响;而利用2-ΔCt和标准曲线法计算方便,节省定量PCR试剂,但其结果易受到RNA浓度测量准确率的影响,其中标准曲线法引入斜率消除扩增效率的影响,最能测得实际的原始拷贝数差异.
利用實時熒光定量PCR方法分析目標基因轉錄本之間的錶達差異,目前常用的分析實驗數據的有絕對定量和相對定量方法.為瞭剋服絕對定量方法的繁瑣和簡化相對定量的分析方法,分彆利用2-ΔΔCt、2-ΔCt和標準麯線法對水稻OsRDB1基因在不同化學試劑和激素處理下的錶達差異進行瞭分析,髮現2-ΔΔCt必鬚引入標準的看傢基因作為參攷,計算方法繁瑣,計算結果受擴增效率影響;而利用2-ΔCt和標準麯線法計算方便,節省定量PCR試劑,但其結果易受到RNA濃度測量準確率的影響,其中標準麯線法引入斜率消除擴增效率的影響,最能測得實際的原始拷貝數差異.
이용실시형광정량PCR방법분석목표기인전록본지간적표체차이,목전상용적분석실험수거적유절대정량화상대정량방법.위료극복절대정량방법적번쇄화간화상대정량적분석방법,분별이용2-ΔΔCt、2-ΔCt화표준곡선법대수도OsRDB1기인재불동화학시제화격소처리하적표체차이진행료분석,발현2-ΔΔCt필수인입표준적간가기인작위삼고,계산방법번쇄,계산결과수확증효솔영향;이이용2-ΔCt화표준곡선법계산방편,절성정량PCR시제,단기결과역수도RNA농도측량준학솔적영향,기중표준곡선법인입사솔소제확증효솔적영향,최능측득실제적원시고패수차이.
