中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2007年
3期
256-258
,共3页
细胞分化%肝细胞生长因子%骨髓间充质干细胞%肝细胞
細胞分化%肝細胞生長因子%骨髓間充質榦細胞%肝細胞
세포분화%간세포생장인자%골수간충질간세포%간세포
目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)在体外定向诱导分化为肝细胞及其方法.方法:采用梯度离心法分离纯化雄性SD大鼠的mMSCs.A组原代培养;B组原代培养分别加刺激因子50 ng/ml肝细胞生长因子(HGF)和50 ng/ml成纤维细胞生长因子4(FGF-4),倒置显微镜连续观察细胞分化过程的形态学变化.于培养的7、14、21、28 d,细胞免疫荧光法检测各组细胞甲胎蛋白(AFP) 、白蛋白(ALB)、细胞角蛋白18(CK-18) 、细胞角蛋白19(CK-19)的表达.采用过碘酸希夫(PAS)染色法检测各组细胞糖原染色情况.结果:分离纯化B组大鼠的mMSCs,应用HGF和FGF-4诱导10 d后变为肝细胞样圆形.细胞免疫荧光测定B组显示,培养第7 d AFP即出现阳性,第21 d表达明显减弱;第7 d CK-19染色阳性,以后增强;第14 d白蛋白与CK-18染色开始阳性,以后表达逐渐加强.A组在培养过程中不表达AFP、ALB、CK-18和CK-19.糖原染色显示,B组第14 d开始阳性,一直持续到第28 d;A组未见阳性染色.结论:大鼠mMSCs在较高浓度的HGF及FGF-4诱导下可分化为肝细胞.
目的:探討大鼠骨髓間充質榦細胞(mMSCs)在體外定嚮誘導分化為肝細胞及其方法.方法:採用梯度離心法分離純化雄性SD大鼠的mMSCs.A組原代培養;B組原代培養分彆加刺激因子50 ng/ml肝細胞生長因子(HGF)和50 ng/ml成纖維細胞生長因子4(FGF-4),倒置顯微鏡連續觀察細胞分化過程的形態學變化.于培養的7、14、21、28 d,細胞免疫熒光法檢測各組細胞甲胎蛋白(AFP) 、白蛋白(ALB)、細胞角蛋白18(CK-18) 、細胞角蛋白19(CK-19)的錶達.採用過碘痠希伕(PAS)染色法檢測各組細胞糖原染色情況.結果:分離純化B組大鼠的mMSCs,應用HGF和FGF-4誘導10 d後變為肝細胞樣圓形.細胞免疫熒光測定B組顯示,培養第7 d AFP即齣現暘性,第21 d錶達明顯減弱;第7 d CK-19染色暘性,以後增彊;第14 d白蛋白與CK-18染色開始暘性,以後錶達逐漸加彊.A組在培養過程中不錶達AFP、ALB、CK-18和CK-19.糖原染色顯示,B組第14 d開始暘性,一直持續到第28 d;A組未見暘性染色.結論:大鼠mMSCs在較高濃度的HGF及FGF-4誘導下可分化為肝細胞.
목적:탐토대서골수간충질간세포(mMSCs)재체외정향유도분화위간세포급기방법.방법:채용제도리심법분리순화웅성SD대서적mMSCs.A조원대배양;B조원대배양분별가자격인자50 ng/ml간세포생장인자(HGF)화50 ng/ml성섬유세포생장인자4(FGF-4),도치현미경련속관찰세포분화과정적형태학변화.우배양적7、14、21、28 d,세포면역형광법검측각조세포갑태단백(AFP) 、백단백(ALB)、세포각단백18(CK-18) 、세포각단백19(CK-19)적표체.채용과전산희부(PAS)염색법검측각조세포당원염색정황.결과:분리순화B조대서적mMSCs,응용HGF화FGF-4유도10 d후변위간세포양원형.세포면역형광측정B조현시,배양제7 d AFP즉출현양성,제21 d표체명현감약;제7 d CK-19염색양성,이후증강;제14 d백단백여CK-18염색개시양성,이후표체축점가강.A조재배양과정중불표체AFP、ALB、CK-18화CK-19.당원염색현시,B조제14 d개시양성,일직지속도제28 d;A조미견양성염색.결론:대서mMSCs재교고농도적HGF급FGF-4유도하가분화위간세포.
