海洋与湖沼
海洋與湖沼
해양여호소
OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA
2007年
4期
343-450
,共108页
付万冬%韩宝芹%王常红%刘万顺
付萬鼕%韓寶芹%王常紅%劉萬順
부만동%한보근%왕상홍%류만순
琼胶降解菌%琼胶酶%培养条件优化%条斑紫菜%原生质体
瓊膠降解菌%瓊膠酶%培養條件優化%條斑紫菜%原生質體
경효강해균%경효매%배양조건우화%조반자채%원생질체
利用琼胶作为唯一的碳源从青岛太平角海域的海水和红藻样品中筛选分离得到一株高产琼胶酶的海洋菌F-6, 对其最适的产酶条件, 利用琼胶酶分离条斑紫菜的原生质体和原生质体的培养进行研究.结果表明, 通过单次单因子和正交实验确定琼胶降解菌株F-6最适产酶培养基配方为(W/V): 琼胶 0.7%; 酵母粉0.3%; 蛋白胨0.5%; NaCl 2.0%; K2HPO4 0.1%; CaCl2 0.02%; MgSO4·7H2O 0.05%; FeSO4·7H2O 0.002%; 起始pH = 7.5, 最适的发酵产酶条件为: 26℃培养36h.经条件优化后, 粗酶液的酶活高达631.6U/ml.发酵液经过6000g离心30min得到粗酶液, 粗酶液经过8k分离膜超滤, 加入1mol/L渗透剂, 0.22?m滤膜过滤除菌后降解条斑紫菜组织块, 成功地分离得到大量的紫菜原生质体, 其产率为3×106个原生质体/g新鲜紫菜组织.原生质体经初步培养发育成愈伤组织, 其成活率为60%.
利用瓊膠作為唯一的碳源從青島太平角海域的海水和紅藻樣品中篩選分離得到一株高產瓊膠酶的海洋菌F-6, 對其最適的產酶條件, 利用瓊膠酶分離條斑紫菜的原生質體和原生質體的培養進行研究.結果錶明, 通過單次單因子和正交實驗確定瓊膠降解菌株F-6最適產酶培養基配方為(W/V): 瓊膠 0.7%; 酵母粉0.3%; 蛋白胨0.5%; NaCl 2.0%; K2HPO4 0.1%; CaCl2 0.02%; MgSO4·7H2O 0.05%; FeSO4·7H2O 0.002%; 起始pH = 7.5, 最適的髮酵產酶條件為: 26℃培養36h.經條件優化後, 粗酶液的酶活高達631.6U/ml.髮酵液經過6000g離心30min得到粗酶液, 粗酶液經過8k分離膜超濾, 加入1mol/L滲透劑, 0.22?m濾膜過濾除菌後降解條斑紫菜組織塊, 成功地分離得到大量的紫菜原生質體, 其產率為3×106箇原生質體/g新鮮紫菜組織.原生質體經初步培養髮育成愈傷組織, 其成活率為60%.
이용경효작위유일적탄원종청도태평각해역적해수화홍조양품중사선분리득도일주고산경효매적해양균F-6, 대기최괄적산매조건, 이용경효매분리조반자채적원생질체화원생질체적배양진행연구.결과표명, 통과단차단인자화정교실험학정경효강해균주F-6최괄산매배양기배방위(W/V): 경효 0.7%; 효모분0.3%; 단백동0.5%; NaCl 2.0%; K2HPO4 0.1%; CaCl2 0.02%; MgSO4·7H2O 0.05%; FeSO4·7H2O 0.002%; 기시pH = 7.5, 최괄적발효산매조건위: 26℃배양36h.경조건우화후, 조매액적매활고체631.6U/ml.발효액경과6000g리심30min득도조매액, 조매액경과8k분리막초려, 가입1mol/L삼투제, 0.22?m려막과려제균후강해조반자채조직괴, 성공지분리득도대량적자채원생질체, 기산솔위3×106개원생질체/g신선자채조직.원생질체경초보배양발육성유상조직, 기성활솔위60%.