中西医结合肝病杂志
中西醫結閤肝病雜誌
중서의결합간병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE ON LIVER DISEASES
2007年
3期
151-153
,共3页
王颖%吴亮%王家(马龙)
王穎%吳亮%王傢(馬龍)
왕영%오량%왕가(마룡)
反义寡核苷酸%survivin%caspase-3%细胞凋亡
反義寡覈苷痠%survivin%caspase-3%細胞凋亡
반의과핵감산%survivin%caspase-3%세포조망
目的:观察survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide, AS ODN)诱导肝癌细胞凋亡的可能途径.方法:培养survivin表达阳性的肝癌细胞株SMMC-7721.设计合成特异性靶向survivin的反义寡核苷酸.将SMMC-7721细胞接种于6孔培养板内,分为6组:①空白对照组;②脂质体转染对照组;③正义链转染对照组;④200nmol/L AS ODN转染组;⑤400nmol/L AS ODN转染组;⑥600nmol/L AS ODN转染组.作用20小时后收获各组细胞,并进行后续实验:①倒置显微镜下观察细胞形态变化;②western blot法检测各组细胞survivin蛋白的表达情况;③流式细胞术检测细胞增殖和凋亡指数;④比色法检测各组细胞caspase-3的活性变化.结果: ①AS ODN转染组细胞survivin表达减弱,以600nmol/L转染组最为明显,各对照组survivin蛋白表达无明显改变;②AS ODN转染组细胞形态出现变圆、折光增强、漂浮、细胞碎片形成等变化,而各对照组细胞生长良好;③各AS ODN转染组细胞凋亡指数明显高于各对照组(P＜0.05),以600nmol/L转染组最为明显,而各对照组间差异无显著性意义(P＞0.05);④各AS ODN转染组细胞增殖指数明显低于各对照组(P＜0.05),以600nmol/L转染组最为明显,而各对照组间差异无显著性意义;⑤在各AS ODN转染组中,可见到不同程度的caspase-3的活化,而对照组细胞内无明显的变化.结论: survivin AS ODN转染能下调survivin蛋白表达,诱导肝癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,其作用途径可能涉及抑制survivin表达,诱导caspase-3活化,启动凋亡信号传导.
目的:觀察survivin反義寡覈苷痠(antisense oligonucleotide, AS ODN)誘導肝癌細胞凋亡的可能途徑.方法:培養survivin錶達暘性的肝癌細胞株SMMC-7721.設計閤成特異性靶嚮survivin的反義寡覈苷痠.將SMMC-7721細胞接種于6孔培養闆內,分為6組:①空白對照組;②脂質體轉染對照組;③正義鏈轉染對照組;④200nmol/L AS ODN轉染組;⑤400nmol/L AS ODN轉染組;⑥600nmol/L AS ODN轉染組.作用20小時後收穫各組細胞,併進行後續實驗:①倒置顯微鏡下觀察細胞形態變化;②western blot法檢測各組細胞survivin蛋白的錶達情況;③流式細胞術檢測細胞增殖和凋亡指數;④比色法檢測各組細胞caspase-3的活性變化.結果: ①AS ODN轉染組細胞survivin錶達減弱,以600nmol/L轉染組最為明顯,各對照組survivin蛋白錶達無明顯改變;②AS ODN轉染組細胞形態齣現變圓、摺光增彊、漂浮、細胞碎片形成等變化,而各對照組細胞生長良好;③各AS ODN轉染組細胞凋亡指數明顯高于各對照組(P＜0.05),以600nmol/L轉染組最為明顯,而各對照組間差異無顯著性意義(P＞0.05);④各AS ODN轉染組細胞增殖指數明顯低于各對照組(P＜0.05),以600nmol/L轉染組最為明顯,而各對照組間差異無顯著性意義;⑤在各AS ODN轉染組中,可見到不同程度的caspase-3的活化,而對照組細胞內無明顯的變化.結論: survivin AS ODN轉染能下調survivin蛋白錶達,誘導肝癌細胞凋亡,抑製細胞增殖,其作用途徑可能涉及抑製survivin錶達,誘導caspase-3活化,啟動凋亡信號傳導.
목적:관찰survivin반의과핵감산(antisense oligonucleotide, AS ODN)유도간암세포조망적가능도경.방법:배양survivin표체양성적간암세포주SMMC-7721.설계합성특이성파향survivin적반의과핵감산.장SMMC-7721세포접충우6공배양판내,분위6조:①공백대조조;②지질체전염대조조;③정의련전염대조조;④200nmol/L AS ODN전염조;⑤400nmol/L AS ODN전염조;⑥600nmol/L AS ODN전염조.작용20소시후수획각조세포,병진행후속실험:①도치현미경하관찰세포형태변화;②western blot법검측각조세포survivin단백적표체정황;③류식세포술검측세포증식화조망지수;④비색법검측각조세포caspase-3적활성변화.결과: ①AS ODN전염조세포survivin표체감약,이600nmol/L전염조최위명현,각대조조survivin단백표체무명현개변;②AS ODN전염조세포형태출현변원、절광증강、표부、세포쇄편형성등변화,이각대조조세포생장량호;③각AS ODN전염조세포조망지수명현고우각대조조(P＜0.05),이600nmol/L전염조최위명현,이각대조조간차이무현저성의의(P＞0.05);④각AS ODN전염조세포증식지수명현저우각대조조(P＜0.05),이600nmol/L전염조최위명현,이각대조조간차이무현저성의의;⑤재각AS ODN전염조중,가견도불동정도적caspase-3적활화,이대조조세포내무명현적변화.결론: survivin AS ODN전염능하조survivin단백표체,유도간암세포조망,억제세포증식,기작용도경가능섭급억제survivin표체,유도caspase-3활화,계동조망신호전도.
