军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2007年
2期
114-117,144
,共5页
肖云贵%张艳宇%吕丽萍%张援平%马平%周锡鹏%姜升阳%许金波
肖雲貴%張豔宇%呂麗萍%張援平%馬平%週錫鵬%薑升暘%許金波
초운귀%장염우%려려평%장원평%마평%주석붕%강승양%허금파
低pH法%巴氏消毒法%S/D法%病毒灭活%聚合酶链反应
低pH法%巴氏消毒法%S/D法%病毒滅活%聚閤酶鏈反應
저pH법%파씨소독법%S/D법%병독멸활%취합매련반응
目的:探讨用长链核酸扩增技术评价病毒灭活效果的可行性.方法:针对伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)糖蛋白gD基因前后的保守区设计预计产物长短不一的5对引物,用半巢式PCR技术扩增经低pH法(4.0±0.1)、巴氏消毒法[(60±1.0)℃]和s/D法(有机溶剂/洗涤荆)处理后的PRV核酸,同时以细胞感染法做平行对照.结果:低pH对PRV核酸有破坏作用,处理时间越长,核酸损伤程度越明显,处理60 min时,6.62 lgTCID50的PRV完全被灭活.5条不同长度PCR扩增产物中,只有3.9 kb的长片段检出与细胞培养结果一致.7.25 lgTCID50的PRV经(60±1.0)℃处理20 min后即被完全灭活,7.13 lgTCID50的PRV经s/D法处理1 h后被完全灭活,但各长度核酸片段扩增均为阳性,与细胞感染试验结果不符.结论:低pH对PRV核酸的损伤程度随处理时间的延长而增加;用长链PCR(3.9 kb)技术来评价经低pH法灭活病毒的效果是可行的,而该法不适合评价巴氏消毒法和S/D法灭活病毒的效果.
目的:探討用長鏈覈痠擴增技術評價病毒滅活效果的可行性.方法:針對偽狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)糖蛋白gD基因前後的保守區設計預計產物長短不一的5對引物,用半巢式PCR技術擴增經低pH法(4.0±0.1)、巴氏消毒法[(60±1.0)℃]和s/D法(有機溶劑/洗滌荊)處理後的PRV覈痠,同時以細胞感染法做平行對照.結果:低pH對PRV覈痠有破壞作用,處理時間越長,覈痠損傷程度越明顯,處理60 min時,6.62 lgTCID50的PRV完全被滅活.5條不同長度PCR擴增產物中,隻有3.9 kb的長片段檢齣與細胞培養結果一緻.7.25 lgTCID50的PRV經(60±1.0)℃處理20 min後即被完全滅活,7.13 lgTCID50的PRV經s/D法處理1 h後被完全滅活,但各長度覈痠片段擴增均為暘性,與細胞感染試驗結果不符.結論:低pH對PRV覈痠的損傷程度隨處理時間的延長而增加;用長鏈PCR(3.9 kb)技術來評價經低pH法滅活病毒的效果是可行的,而該法不適閤評價巴氏消毒法和S/D法滅活病毒的效果.
목적:탐토용장련핵산확증기술평개병독멸활효과적가행성.방법:침대위광견병독(pseudorabies virus,PRV)당단백gD기인전후적보수구설계예계산물장단불일적5대인물,용반소식PCR기술확증경저pH법(4.0±0.1)、파씨소독법[(60±1.0)℃]화s/D법(유궤용제/세조형)처리후적PRV핵산,동시이세포감염법주평행대조.결과:저pH대PRV핵산유파배작용,처리시간월장,핵산손상정도월명현,처리60 min시,6.62 lgTCID50적PRV완전피멸활.5조불동장도PCR확증산물중,지유3.9 kb적장편단검출여세포배양결과일치.7.25 lgTCID50적PRV경(60±1.0)℃처리20 min후즉피완전멸활,7.13 lgTCID50적PRV경s/D법처리1 h후피완전멸활,단각장도핵산편단확증균위양성,여세포감염시험결과불부.결론:저pH대PRV핵산적손상정도수처리시간적연장이증가;용장련PCR(3.9 kb)기술래평개경저pH법멸활병독적효과시가행적,이해법불괄합평개파씨소독법화S/D법멸활병독적효과.
