中国临床康复
中國臨床康複
중국림상강복
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATION
2006年
28期
94-96
,共3页
张雪松%马胜忠%王岩%侯铁胜
張雪鬆%馬勝忠%王巖%侯鐵勝
장설송%마성충%왕암%후철성
RNA,小分子干扰%单核细胞化学吸引蛋白质1%遗传载体%质粒
RNA,小分子榦擾%單覈細胞化學吸引蛋白質1%遺傳載體%質粒
RNA,소분자간우%단핵세포화학흡인단백질1%유전재체%질립
目的:构建单核细胞趋化因子l发卡环RNA真核表达载体.方法:实验于2002-10/2003-05在解放军第二军医大学中心实验室完成.①单核细胞趋化因子1发卡小分子干扰RNA片段合成.②将发卡小分子干扰RNA克隆入质粒pSilencer产生重组质粒SiRNA-pSilencer-单核细胞趋化因子1.③分别用BamH Ⅰ和HindⅢ酶切鉴定,随机分为1,2样本,每份样本进行10次电泳,并且采用460 bpi标准参照样.④将经酶切鉴定后的重组质粒作测序分析.结果:①单核细胞趋化因子1发卡小分子干扰RNA片段被成功克隆进pSilencer-U6质粒中.②BamH Ⅰ和HindⅢ酶切鉴定可切出450 bpi大小的片段,结果表明样本1,2均与参照以及marker相一致,从片段大小的角度初步确定酶切的准确.③DNA测序分析显示,重组质粒小分子干扰RNA编码序列与设计片段的序列完全一致.结论:针对单核细胞趋化因子1发卡小分子干扰RNA片段的真核表达载体SiRNA-pSilencer-单核细胞趋化因子1的成功构建,为进一步研究其基因功能打下了基础.
目的:構建單覈細胞趨化因子l髮卡環RNA真覈錶達載體.方法:實驗于2002-10/2003-05在解放軍第二軍醫大學中心實驗室完成.①單覈細胞趨化因子1髮卡小分子榦擾RNA片段閤成.②將髮卡小分子榦擾RNA剋隆入質粒pSilencer產生重組質粒SiRNA-pSilencer-單覈細胞趨化因子1.③分彆用BamH Ⅰ和HindⅢ酶切鑒定,隨機分為1,2樣本,每份樣本進行10次電泳,併且採用460 bpi標準參照樣.④將經酶切鑒定後的重組質粒作測序分析.結果:①單覈細胞趨化因子1髮卡小分子榦擾RNA片段被成功剋隆進pSilencer-U6質粒中.②BamH Ⅰ和HindⅢ酶切鑒定可切齣450 bpi大小的片段,結果錶明樣本1,2均與參照以及marker相一緻,從片段大小的角度初步確定酶切的準確.③DNA測序分析顯示,重組質粒小分子榦擾RNA編碼序列與設計片段的序列完全一緻.結論:針對單覈細胞趨化因子1髮卡小分子榦擾RNA片段的真覈錶達載體SiRNA-pSilencer-單覈細胞趨化因子1的成功構建,為進一步研究其基因功能打下瞭基礎.
목적:구건단핵세포추화인자l발잡배RNA진핵표체재체.방법:실험우2002-10/2003-05재해방군제이군의대학중심실험실완성.①단핵세포추화인자1발잡소분자간우RNA편단합성.②장발잡소분자간우RNA극륭입질립pSilencer산생중조질립SiRNA-pSilencer-단핵세포추화인자1.③분별용BamH Ⅰ화HindⅢ매절감정,수궤분위1,2양본,매빈양본진행10차전영,병차채용460 bpi표준삼조양.④장경매절감정후적중조질립작측서분석.결과:①단핵세포추화인자1발잡소분자간우RNA편단피성공극륭진pSilencer-U6질립중.②BamH Ⅰ화HindⅢ매절감정가절출450 bpi대소적편단,결과표명양본1,2균여삼조이급marker상일치,종편단대소적각도초보학정매절적준학.③DNA측서분석현시,중조질립소분자간우RNA편마서렬여설계편단적서렬완전일치.결론:침대단핵세포추화인자1발잡소분자간우RNA편단적진핵표체재체SiRNA-pSilencer-단핵세포추화인자1적성공구건,위진일보연구기기인공능타하료기출.
