中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2006年
5期
283-286
,共4页
陈文吟%饶桂荣%任向荣%郑业华%粟宽源
陳文吟%饒桂榮%任嚮榮%鄭業華%粟寬源
진문음%요계영%임향영%정업화%속관원
抗HBsAg单链抗体%单克隆抗体%制备
抗HBsAg單鏈抗體%單剋隆抗體%製備
항HBsAg단련항체%단극륭항체%제비
目的 获得抗HBsAg单链抗体 (HBScFv)的单克隆抗体,并初步研究其在抗HBsAg类小分子抗体及其融合蛋白质的纯化、活性鉴定方面的应用.方法 利用杂交瘤技术,以大肠杆菌表达的重组抗HBScFv为抗原,免疫Balb/c小鼠,再将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合.通过ELISA法、Western-blot鉴定特异性单克隆抗体,通过免疫双扩散法鉴定单抗亚型,并将筛选到的高效价单抗用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及ELISA鉴定.结果 建立了9株能够稳定分泌抗HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株,其细胞上清效价为1:160～1:12 800,腹水效价为1:50 000～1:400 000;单克隆抗体的亚类分析结果显示有6株为IgG1,其余3株为IgG2a.初步应用结果 表明制备的单克隆抗体14F7可用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及活性鉴定.结论 成功建立了能够稳定分泌HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株.
目的 穫得抗HBsAg單鏈抗體 (HBScFv)的單剋隆抗體,併初步研究其在抗HBsAg類小分子抗體及其融閤蛋白質的純化、活性鑒定方麵的應用.方法 利用雜交瘤技術,以大腸桿菌錶達的重組抗HBScFv為抗原,免疫Balb/c小鼠,再將小鼠脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞SP2/0進行細胞融閤.通過ELISA法、Western-blot鑒定特異性單剋隆抗體,通過免疫雙擴散法鑒定單抗亞型,併將篩選到的高效價單抗用于抗HBsAg Fab抗體等重組蛋白質的親和色譜及ELISA鑒定.結果 建立瞭9株能夠穩定分泌抗HBScFv特異性單剋隆抗體的細胞株,其細胞上清效價為1:160～1:12 800,腹水效價為1:50 000～1:400 000;單剋隆抗體的亞類分析結果顯示有6株為IgG1,其餘3株為IgG2a.初步應用結果 錶明製備的單剋隆抗體14F7可用于抗HBsAg Fab抗體等重組蛋白質的親和色譜及活性鑒定.結論 成功建立瞭能夠穩定分泌HBScFv特異性單剋隆抗體的細胞株.
목적 획득항HBsAg단련항체 (HBScFv)적단극륭항체,병초보연구기재항HBsAg류소분자항체급기융합단백질적순화、활성감정방면적응용.방법 이용잡교류기술,이대장간균표체적중조항HBScFv위항원,면역Balb/c소서,재장소서비세포여소서골수류세포SP2/0진행세포융합.통과ELISA법、Western-blot감정특이성단극륭항체,통과면역쌍확산법감정단항아형,병장사선도적고효개단항용우항HBsAg Fab항체등중조단백질적친화색보급ELISA감정.결과 건립료9주능구은정분비항HBScFv특이성단극륭항체적세포주,기세포상청효개위1:160～1:12 800,복수효개위1:50 000～1:400 000;단극륭항체적아류분석결과현시유6주위IgG1,기여3주위IgG2a.초보응용결과 표명제비적단극륭항체14F7가용우항HBsAg Fab항체등중조단백질적친화색보급활성감정.결론 성공건립료능구은정분비HBScFv특이성단극륭항체적세포주.
