川北医学院学报
川北醫學院學報
천북의학원학보
JOURNAL OF NORTH SICHUAN MEDICAL COLLEGE
2006年
3期
211-214
,共4页
赵明才%鲍朗%吴悦涵%张会东
趙明纔%鮑朗%吳悅涵%張會東
조명재%포랑%오열함%장회동
结核分枝杆菌%Rv2994基因%穿梭载体
結覈分枝桿菌%Rv2994基因%穿梭載體
결핵분지간균%Rv2994기인%천사재체
目的构建结核分枝杆菌假想药物外排泵蛋白编码基因Rv2994的重组穿梭质粒pMV-2994,并对其进行鉴定. 方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,应用PCR技术扩增Rv2994基因编码序列,定向克隆入融合蛋白原核表达载体pGEX-1λT,获得重组表达质粒pGEX-2994,测序鉴定.酶切该基因片段,定向重组入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭载体pMV261,构建重组质粒pMV-2994,通过限制性内切酶酶切及PCR鉴定.结果从结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出的Rv2994基因与GenBank公布的序列一致,经过酶切及PCR鉴定,表明Rv2994基因成功插入了pMV261穿梭载体. 结论成功构建了重组穿梭质粒pMV-2994,为进一步研究Rv2994基因功能奠定了基础.
目的構建結覈分枝桿菌假想藥物外排泵蛋白編碼基因Rv2994的重組穿梭質粒pMV-2994,併對其進行鑒定. 方法以結覈分枝桿菌H37Rv基因組為模闆,應用PCR技術擴增Rv2994基因編碼序列,定嚮剋隆入融閤蛋白原覈錶達載體pGEX-1λT,穫得重組錶達質粒pGEX-2994,測序鑒定.酶切該基因片段,定嚮重組入大腸桿菌-分枝桿菌穿梭載體pMV261,構建重組質粒pMV-2994,通過限製性內切酶酶切及PCR鑒定.結果從結覈分枝桿菌H37Rv株基因組DNA中擴增齣的Rv2994基因與GenBank公佈的序列一緻,經過酶切及PCR鑒定,錶明Rv2994基因成功插入瞭pMV261穿梭載體. 結論成功構建瞭重組穿梭質粒pMV-2994,為進一步研究Rv2994基因功能奠定瞭基礎.
목적구건결핵분지간균가상약물외배빙단백편마기인Rv2994적중조천사질립pMV-2994,병대기진행감정. 방법이결핵분지간균H37Rv기인조위모판,응용PCR기술확증Rv2994기인편마서렬,정향극륭입융합단백원핵표체재체pGEX-1λT,획득중조표체질립pGEX-2994,측서감정.매절해기인편단,정향중조입대장간균-분지간균천사재체pMV261,구건중조질립pMV-2994,통과한제성내절매매절급PCR감정.결과종결핵분지간균H37Rv주기인조DNA중확증출적Rv2994기인여GenBank공포적서렬일치,경과매절급PCR감정,표명Rv2994기인성공삽입료pMV261천사재체. 결론성공구건료중조천사질립pMV-2994,위진일보연구Rv2994기인공능전정료기출.
