黑胸大蠊浓核病毒磷脂酶A2功能区的克隆及其表达
흑흉대렴농핵병독린지매A2공능구적극륭급기표체
Cloning and Expression of Phospholipase A2 Domain of Periplaneta fuliginosa Densovirus in E. coli
  • 万方数据
    中国病毒学 중국병독학
    VIROLOGICA SINICA
    2006年 2期 181-185 ,共5页

    俞海洋%张珈敏%杨波%蒋洪%周亮%卢杰%陈伍国%李斗林%胡远扬

    유해양%장가민%양파%장홍%주량%로걸%진오국%리두림%호원양

    黑胸大蠊浓核病毒(PfDNV)%磷脂酶A2%原核表达 黑胸大蠊濃覈病毒(PfDNV)%燐脂酶A2%原覈錶達
    흑흉대렴농핵병독(PfDNV)%린지매A2%원핵표체
    通过RT-PCR扩增获得PfDNV结构蛋白基因VP1含磷脂酶A2(PL A2)功能区片段,将其连接到pMD18-T载体上并亚克隆到原核表达载体pET28a和pET26b,构建阅读框架正确的重组表达载体pET28a-PLA和pET26b-PLA,转化大肠杆菌BL21-codonplus(DE3)-RIL,经IPTG诱导,SDS-PAGE显示得到了目的融合蛋白,以抗组氨酸的单克隆抗体对经Ni-NTA亲和层析柱纯化的目的蛋白进行了western blot鉴定,结果表明成功表达PfDNV结构蛋白PLA2,对于研究该酶的生物学特性及其在病毒对细胞侵染过程中的功能奠定了基础.
    통과RT-PCR확증획득PfDNV결구단백기인VP1함린지매A2(PL A2)공능구편단,장기련접도pMD18-T재체상병아극륭도원핵표체재체pET28a화pET26b,구건열독광가정학적중조표체재체pET28a-PLA화pET26b-PLA,전화대장간균BL21-codonplus(DE3)-RIL,경IPTG유도,SDS-PAGE현시득도료목적융합단백,이항조안산적단극륭항체대경Ni-NTA친화층석주순화적목적단백진행료western blot감정,결과표명성공표체PfDNV결구단백PLA2,대우연구해매적생물학특성급기재병독대세포침염과정중적공능전정료기출.
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