医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2006年
2期
101-104
,共4页
郑伟%马鹤雯%张立树%张永亮%张玉静
鄭偉%馬鶴雯%張立樹%張永亮%張玉靜
정위%마학문%장립수%장영량%장옥정
牵引丝蛋白基因%六聚物%克隆%表达
牽引絲蛋白基因%六聚物%剋隆%錶達
견인사단백기인%륙취물%극륭%표체
目的克隆与原核表达"牵引丝蛋白基因"单体六聚物,为开展具有不同长度系列的"牵引丝蛋白基因"单体多聚物的功能研究奠定基础.方法以"牵引丝蛋白基因"单体为基础,利用同尾酶聚合法构建含"牵引丝蛋白基因"单体六聚物的重组克隆质粒pUC18-6 S和重组原核表达质粒pET-28a(+)-6S.将pET-28a(+)-6 S转化至大肠杆菌BL21(DE3)宿主细胞感受态菌中,利用IPTG进行诱导.结果重组克隆质粒pUC18-6 S和重组原核表达质粒pET-28a(+)-6 S的测序结果与预期设计序列相同;SDS-PAGE结果发现,目的基因以包涵体的形式表达;薄层扫描分析结果表明,6 S蛋白的表达量约占菌体总蛋白的19%.结论克隆获得了"牵引丝蛋白基因"单体六聚物的重组克隆质粒和重组表达质粒,且重组表达质粒在原核系统中以包涵体的形式表达6 S蛋白.
目的剋隆與原覈錶達"牽引絲蛋白基因"單體六聚物,為開展具有不同長度繫列的"牽引絲蛋白基因"單體多聚物的功能研究奠定基礎.方法以"牽引絲蛋白基因"單體為基礎,利用同尾酶聚閤法構建含"牽引絲蛋白基因"單體六聚物的重組剋隆質粒pUC18-6 S和重組原覈錶達質粒pET-28a(+)-6S.將pET-28a(+)-6 S轉化至大腸桿菌BL21(DE3)宿主細胞感受態菌中,利用IPTG進行誘導.結果重組剋隆質粒pUC18-6 S和重組原覈錶達質粒pET-28a(+)-6 S的測序結果與預期設計序列相同;SDS-PAGE結果髮現,目的基因以包涵體的形式錶達;薄層掃描分析結果錶明,6 S蛋白的錶達量約佔菌體總蛋白的19%.結論剋隆穫得瞭"牽引絲蛋白基因"單體六聚物的重組剋隆質粒和重組錶達質粒,且重組錶達質粒在原覈繫統中以包涵體的形式錶達6 S蛋白.
목적극륭여원핵표체"견인사단백기인"단체륙취물,위개전구유불동장도계렬적"견인사단백기인"단체다취물적공능연구전정기출.방법이"견인사단백기인"단체위기출,이용동미매취합법구건함"견인사단백기인"단체륙취물적중조극륭질립pUC18-6 S화중조원핵표체질립pET-28a(+)-6S.장pET-28a(+)-6 S전화지대장간균BL21(DE3)숙주세포감수태균중,이용IPTG진행유도.결과중조극륭질립pUC18-6 S화중조원핵표체질립pET-28a(+)-6 S적측서결과여예기설계서렬상동;SDS-PAGE결과발현,목적기인이포함체적형식표체;박층소묘분석결과표명,6 S단백적표체량약점균체총단백적19%.결론극륭획득료"견인사단백기인"단체륙취물적중조극륭질립화중조표체질립,차중조표체질립재원핵계통중이포함체적형식표체6 S단백.
