华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2006年
1期
27-30
,共4页
PRRSV%基因克隆%原核表达%真核表达
PRRSV%基因剋隆%原覈錶達%真覈錶達
PRRSV%기인극륭%원핵표체%진핵표체
分别以质粒pBV221和pPIC9K为表达载体,成功构建了PRRS病毒E基因克隆载体,转化后经抗性筛选、PCR扩增、双酶切鉴定,确认得到了含有目的基因的阳性克隆.对含有E蛋白原核表达载体的阳性克隆进行诱导表达,经过酶联免疫鉴定,结果显示外源蛋白在宿主菌中有表达,成功实现了在大肠杆菌细胞中的克隆.本研究成功构建了PRRSV BJ-4毒株E基因的原核表达载体和真核表达载体,为基因工程疫苗的研制奠定了基础.
分彆以質粒pBV221和pPIC9K為錶達載體,成功構建瞭PRRS病毒E基因剋隆載體,轉化後經抗性篩選、PCR擴增、雙酶切鑒定,確認得到瞭含有目的基因的暘性剋隆.對含有E蛋白原覈錶達載體的暘性剋隆進行誘導錶達,經過酶聯免疫鑒定,結果顯示外源蛋白在宿主菌中有錶達,成功實現瞭在大腸桿菌細胞中的剋隆.本研究成功構建瞭PRRSV BJ-4毒株E基因的原覈錶達載體和真覈錶達載體,為基因工程疫苗的研製奠定瞭基礎.
분별이질립pBV221화pPIC9K위표체재체,성공구건료PRRS병독E기인극륭재체,전화후경항성사선、PCR확증、쌍매절감정,학인득도료함유목적기인적양성극륭.대함유E단백원핵표체재체적양성극륭진행유도표체,경과매련면역감정,결과현시외원단백재숙주균중유표체,성공실현료재대장간균세포중적극륭.본연구성공구건료PRRSV BJ-4독주E기인적원핵표체재체화진핵표체재체,위기인공정역묘적연제전정료기출.