CAJ | 학술논문

目的用GeneSOEing技术构建含日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶及副肌球蛋白T、B细胞表位的复合表位DNA质粒.方法将一个柔性的氨基酸"接头"插入真核表达质粒载体 pcDNA3.1中,构建pcDNA3.1-linker.PCR法扩增磷酸丙糖异构酶表位基因片段(T).人工合成副肌球蛋白表位的基因片段,退火成双链(P).分别将T、P片段克隆入改建的载体pcDNA3.1中linker的上游和下游,构建T- P融合基因;同时还将T、P片段分别克隆入linker的下游和上游,构建P-T融合基因.重组质粒分别转化E.coli XL1-blue,抽提质粒,酶切鉴定.结果两个目的基因片段分别按顺序克隆入真核表达质粒载体pcDNA3.1中,构建成复合表位DNA质粒.结论成功地构建了复合表位DNA质粒,为制备多价表位DNA疫苗奠定了基础.
목적용GeneSOEing기술구건함일본혈흡충중국대륙주린산병당이구매급부기구단백T、B세포표위적복합표위DNA질립.방법장일개유성적안기산"접두"삽입진핵표체질립재체 pcDNA3.1중,구건pcDNA3.1-linker.PCR법확증린산병당이구매표위기인편단(T).인공합성부기구단백표위적기인편단,퇴화성쌍련(P).분별장T、P편단극륭입개건적재체pcDNA3.1중linker적상유화하유,구건T- P융합기인;동시환장T、P편단분별극륭입linker적하유화상유,구건P-T융합기인.중조질립분별전화E.coli XL1-blue,추제질립,매절감정.결과량개목적기인편단분별안순서극륭입진핵표체질립재체pcDNA3.1중,구건성복합표위DNA질립.결론성공지구건료복합표위DNA질립,위제비다개표위DNA역묘전정료기출.